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水产品中4种食源性致病菌多重PCR检测方法的建立  
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【英文篇名】 Establishment of multiplex-PCR method for detecting four foodborne pathogenic bacteria in aquatic products
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【作者】 童桂香; 黎小正; 韦信贤; 吴祥庆; 黄国秋; 谢宗升; 黄光华; 兰柳春;
【英文作者】 TONG Gui-xiang; LI Xiao-zheng; WEI Xin-xian; WU Xiang-qing; HUANG Guo-qiu; XIE Zong-sheng; HUANG Guang-hua; LAN Liu-chun; Guangxi Academy of Fishery Science;
【作者单位】 广西水产科学研究院;
【文献出处】 南方农业学报 , Journal of Southern Agriculture, 编辑部邮箱 2015年 12期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 水产品; 沙门氏菌; 大肠杆菌O157∶H7; 志贺氏菌; 金黄色葡萄球菌; 多重PCR;
【英文关键词】 aquatic products; Salmonella spp.; E.coli O157∶H7; Shigella spp.; S.aureus; multiplex-PCR;
【摘要】 【目的】建立能同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR,为水产品质量安全检测工作提供技术支持。【方法】以LB肉汤培养基为共增菌培养基,根据沙门氏菌inv A基因、大肠杆菌O157∶H7 rfb E基因、志贺氏菌ipa H基因和金黄色葡萄球菌fem A基因的保守序列设计引物,对引物浓度配比、退火温度及反应体系等进行优化,并对建立的多重PCR进行特异性、敏感性及临床样品检验试验。【结果】4种目标致病菌在LB肉汤培养基中36℃培养18 h后,均表现出良好的生长趋势,增菌数量级均在108 CFU/m L以上。优化后的多重PCR能对4种目标菌的单一或混合基因组DNA进行特异性扩增,而对单增李斯特氏菌、肺炎克雷伯菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌等其他菌株的基因组DNA均未扩增出任何条带;对沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7和金黄色葡萄球菌的最低检出限为102 CFU/m L,对志贺氏菌最低检出限为10 CFU/m L。应用该多重PCR对56份水产品进行检测,其结果与按照GB/T 4789-2003、GB/T 4789-2010检测的结果一致。【结论】针对同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O...
【英文摘要】 【Objective 】The rapid multiplex-PCR method was established to detect simultaneously four foodborne pathogenic bacteria viz., Salmonella spp., Escherichia coli O157∶H7, Shigella spp. and Staphylococcus aureus, in order to provide technical support for quality and safety detection of aquatic products. 【Method】LB broth medium was used as enrichment medium to culture four foodborne pathogenic bacteria viz., Salmonella spp., E. coli O157:H7, Shigella spp. and S. aureus. Meanwhile, four pairs of primers were desi...
【基金】 广西科技攻关项目(桂科攻1355010-3)
【更新日期】 2016-03-03
【分类号】 TS254.7
【正文快照】 (Guangxi Academy of Fishery Science,Nanning 530021,China)0引言【研究意义】近年来,我国因致病菌污染引起食品中毒事件频繁发生,食源性致病菌已成为影响食品安全的最主要因素之一(董庆利等,2015)。随着渔业经济的发展及食品加工技术的进步,我国水产品市场供应日趋丰富,消费

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