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红鳍东方鲀白介素15的原核表达及其活性测定  
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【英文篇名】 Prokaryotic expression and biological activity evaluation of recombinan IL15 from tiger pufferfish Takifugu rubripes
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【作者】 孙赛红; 马普; 李慧; 孙鹤; 孔德荣; 李凤华; 仇雪梅; 姜志强; 刘海映; 刘圣聪; 王秀利;
【英文作者】 SUN Sai-hong; MA Pu; LI Hui; SUN He; KONG De-rong; LI Feng-hua; QIU Xue-mei; JIANG Zhi-qiang; LIU Hai-ying; LIU Sheng-chong; WANG Xiu-li; College of Fisheries and Life Science; Dalian Ocean University; Dalian Sanyi Animal Medicine Co.; Ltd.; College of Marine Science and Environment; Dalian Tianzheng Industrial Corporation Limited;
【作者单位】 大连海洋大学水产与生命学院; 大连三仪动物药品有限公司; 大连海洋大学海洋科技与环境学院; 大连天正实业有限公司;
【文献出处】 大连海洋大学学报 , Journal of Dalian Ocean University, 编辑部邮箱 2015年 06期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 红鳍东方鲀; 白介素-15; 原核表达; 活性鉴定;
【英文关键词】 Takifugu rubripes; interleukin-15; prokaryotic expression; biological activity evaluation;
【摘要】 为了开发红鳍东方鲀Takifugu rubripes免疫基因及其重组表达,生产重组免疫因子蛋白,通过提取红鳍东方鲀肾脏组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到白介素15(interleukin15,IL15)基因序列,将IL15成熟肽序列与原核表达载体p ET-32a(+)连接,成功构建重组表达载体(重组子)p ET-32a(+)-IL15,并将其重组子转化至Escheria coli BL21(DE3)感受态细胞中获得重组表达IL15的基因工程菌,再经IPTG诱导,p ET-32a(+)-IL15在BL21中得到了融合表达。结果表明:通过对表达产物的纯化和Western Blotting检测,红鳍东方鲀IL15在大肠杆菌中的表达量较高,蛋白浓度为294.6μg/m L;用MTT法对该蛋白进行活性鉴定显示,加入稀释10倍和100倍的重组红鳍东方鲀IL15蛋白时,CTLL-2细胞的增殖率相对较高,分别为71%和73%。研究表明,重组红鳍东方鲀IL15蛋白具有体外促进CTLL-2细胞增值的能力。
【英文摘要】 To exploit recomibinant protein of tiger pufferfish Takifugu rubripes by expression of immune gene and recominant immune factors,the tiger pufferfish interleukin-15(IL15) gene sequence was obtained from kidney tissue by RT-PCR,and the recombinant DNA p ET-32a(+)-IL15 was constructed by link mature peptide gene sequences and prokaryotic expression vector p ET-32a(+).The genetic engineering bacteria of recombinant expression IL15 by transforming p ET-32a(+)-IL15 into Escheria coli BL21(DE3),and the fusion pro...
【基金】 国家海洋公益性行业科研专项(201405003-2); 大连市科技计划项目(2014B11NC091)
【更新日期】 2016-01-22
【分类号】 S917.4
【正文快照】 红鳍东方鲀Takifugu rubripes是一种重要的海水养殖鱼类。近年来,由于海水养殖环境的恶化及该品种个体抗病力的弱化,红鳍东方鲀病害时有发生,给养殖生产和出口创汇造成了严重的经济损失[1]。随着红鳍东方鲀高密度、工厂化、集约化养殖模式的建立和推广,养殖面积不断扩大,病害问

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