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人原代胃癌细胞中肿瘤干细胞的分离与鉴定  
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【英文篇名】 Isolation and identii cation of cancer stem cells in human gastric cancer primary cells
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【作者】 胡孔旺; 秦蓉; 吴黎明; 朱化刚; 韩文秀; 尹纯林; 李鸿君;
【英文作者】 HU Kong-wang; QIN Rong; WU Li-ming; ZHU Hua-gang; HAN Wen-xiu; YIN Chun-lin; LI Hong-jun; Department of General Surgery; First Affiliated Hospital of Anhui Medical University; Department of Pathology; Department of Radiation Therapy;
【作者单位】 安徽医科大学第一附属医院普外科; 安徽医科大学第一附属医院病理科; 安徽医科大学第一附属医院放疗科;
【文献出处】 肿瘤 , Tumor, 编辑部邮箱 2014年 08期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 胃肿瘤; 肿瘤干细胞; 抗原; CD44; 动物; 实验性;
【英文关键词】 Stomach neoplasms; Neoplastic stem cells; Antigens; CD44; Animal; laboratory;
【摘要】 目的 :探讨联合应用无血清微球培养技术及磁珠分离技术从新鲜胃癌组织中分离与鉴定人胃癌干细胞的方法。方法 :利用新鲜胃癌组织获得胃癌原代培养细胞,行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)免疫组织化学鉴定证实为胃癌细胞后,体外进一步行无血清微球体培养获得胃癌微球体细胞;采用免疫荧光法检测胃癌球体细胞中CD44的表达,并以CD44为标志物对胃癌球体细胞进行免疫磁珠分选;将分选出的CD44+细胞接种SCID小鼠,观察移植瘤的生长情况,HE染色观察移植瘤组织中细胞形态结构的情况,免疫组织化学法检测CEA和CD44的表达情况。结果 :17例新鲜胃癌组织中成功培养出高、中和低分化程度胃癌细胞各1例;以无血清微球体培养法培养获得胃癌微球体细胞中CD44高表达;分选获得的CD44+细胞更早更快形成移植瘤,移植瘤组织见干细胞的自我更新及分化特性。结论 :利用无血清微球体培养法结合以CD44为标志物的免疫磁珠分离技术可以高效募集新鲜胃癌组织中的肿瘤干细胞。
【英文摘要】 Objective: To isolate and identify the cancer stem cells in human fresh gastric cancer primary cells by combined spherical cultivation in serum-free culture media and immunomagneticbeads isolation technique. Methods: The gastric cancer primary cells in fresh gastric cancer tissues were cultured successfully, which were identified by hematoxylin- eosin(HE) stainning and carcino-embryonic antigen(CEA) immunohistochemisty. The gastric cancer cell spheres were obtained by spherical cultivation in serum-free cul...
【基金】 安徽高校省级自然科学研究资助项目(编号:KJ2010A171); 安徽医科大学第一附属医院2014后备人才项目(编号:2014-8)
【更新日期】 2014-10-11
【分类号】 R735.2
【正文快照】 长期以来,肿瘤研究都是生物医学研究的一个重点和难点,传统的肿瘤研究理论把肿瘤看作为一个均一的细胞团体,并认为肿瘤生长是所有肿瘤细胞共同增殖的结果。随着干细胞理论研究的深入,Reya等[1]提出“肿瘤干细胞假说”的理论,根据该理论胃癌组织中也必然存在肿瘤干细胞。但目前?

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