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生物素标记奶牛冷冻精子膜蛋白的提取、纯化与初步鉴定
【摘要】 本文通过利用膜不透性的生物素试剂Sulfo-NHS-SS-Biotin原位标记完整的奶牛精子细胞表面蛋白质,通过验证生物素与精子细胞表面的特异性结合,然后裂解细胞,用中性亲和素琼脂糖树脂纯化生物素化的蛋白质。最后用TCA浓缩膜蛋白。实验结果表明生物素特异的与精子细胞表面膜蛋白结合,通过中性亲和素琼脂糖树脂纯化出来的膜蛋白浓度较低,通过TCA蛋白浓缩后,膜蛋白浓度有了明显提升。建立了奶牛精子膜蛋白的生物素标记验证体系,通过提取、亲和纯化、TCA浓缩等步骤成功的得到了较高浓度的奶牛精子膜蛋白。
【基金】 国家自然科学基金(No.30901090/C120209);湖南省教育厅科学研究优秀青年项目(No.09B046);湖南省研究生创新基金项目资助(No.CX2009B154)
- 【文献出处】 中国畜牧兽医文摘 , 编辑部邮箱 ,2014年06期
- 【分类号】S823
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