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双抗夹心ELISA检测犬粪贾第虫抗原方法的建立及应用  
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【英文篇名】 Establishment and use of double-antibody sandwich ELISA to detect Giardia canis antigen in dog feces
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【作者】 宋百军; 刘原源; 宫鹏涛; 李建华; 杨举; 李赫; 张西臣;
【英文作者】 SONG Bai-jun; LIU Yuan-yuan; GONG Peng-tao; LI Jian-hua; YANG Ju; LI He; ZHANG Xi-chen; College of Veterinary Medicine; Jilin University; College of Jilin Agriculture Science and Technology;
【作者单位】 吉林大学动物医学学院; 吉林农业科技学院;
【文献出处】 中国病原生物学杂志 , Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱 2014年 10期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 贾第虫; 双抗夹心ELISA; 单克隆抗体; 贾第素α-12;
【英文关键词】 Giardia; double-antibody sandwich ELISA; monoclonal antibody; α-12 Giardin;
【摘要】 目的建立简便、特异的检测犬粪贾第虫抗原贾第素α-12的双抗夹心ELISA方法。方法利用辣根过氧化物酶标记抗贾第素α-12单克隆抗体4C9,通过过滤、超声的方法处理犬粪样品。以抗贾第素α-12单克隆抗体3H10为捕获抗体,5%脱脂奶粉作为封闭剂,辣根过氧化物酶标记的抗贾第素α-12单克隆抗体4C9为检测抗体,经底物显色后,用酶标仪测量490nm处的吸光度(A)值。通过棋盘滴定法确定抗体最适包被浓度、最佳封闭剂、待检粪液最佳稀释度及酶标抗体最佳稀释度。应用建立的ELISA方法对122份犬粪样品进行检测。结果建立的双抗夹心ELISA检测标准阳性样品的A490为0.465,标准阴性样品的A490为0.098;优化的最佳检测条件为:抗体包被浓度为0.01mg/ml,封闭剂为1%BSA,粪液稀释度为1∶2,酶标二抗稀释度为1∶400,该试验与犬等孢球虫、犬隐孢子虫、犬蛔虫样品均无交叉反应,批间和批内变异系数较小,重复性好。应用本方法对122份犬粪进行检测,阳性率为36.9%。结论建立的双抗夹心ELISA方法特异性高,重复性好,为贾第虫流行病学调查提供了一种更简便、快速、特异的免疫学检测方法。
【英文摘要】 To establish double-antibody sandwich ELISA to detect Giardia canis antigen(α-12Giardin)in dog feces. Methods The monoclonal antibody 4C9 was labelled with HRP.Fecal samples were filtered and subjected to ultrasound.The monoclonal antibody 3H10 was used as a capture antibody,and the HRP-labeled monoclonal antibody 4C9 was used as a detection antibody;5%skimmed milk powder was used as a blocking agent.Once the color of the substrate changed,the absorbance at 490nm(A490)was measured.The optimal concentration ...
【基金】 国家自然科学基金项目(No.30970322)
【更新日期】 2014-12-30
【分类号】 S852.7
【正文快照】 ***蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lambila)是一种世界范围分布的人兽共患原虫,主要寄生于包括人在内的哺乳动物、鸟类以及两栖类等动物,可引起人或动物的贾第虫病[1]。贾第虫是旅游者腹泻的一个重要原因,亦是艾滋病患者的致死病因之一。此外,贾第虫被称为“生物活化石”,它是从原核?

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