天然免疫分子LILRB5慢病毒稳定转染THP-1细胞系的构建-中国学术期刊网络出版总库

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天然免疫分子LILRB5慢病毒稳定转染THP-1细胞系的构建

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【英文篇名】	Creation of a THP-1 cell line via stable transfection of a lentivirus vector containing LILRB5
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【作者】	王希娣; 张之勇; 任霞; 宋冠华; 禹林昌; 史美艳; 袁晓芬; 郭强; 李莲莲; 张晓瑜; 姜国胜;
【英文作者】	WANG Xi-di; ZHANG Zhi-yong; REN Xia; SONG Guan-hua; YU Lin-chang; SHI Mei-yan; YUAN Xiao-fen; GUO Qiang; LI Lian-lian; ZHANG Xiao-yu; JIANG Guo-sheng; School of Medicine and Life Sciences; University of Jinan; Shandong Academy of Medical Sciences;
【作者单位】	济南大学医学与生命科学学院; 山东省医学科学院基础医学研究所;
【文献出处】	中国病原生物学杂志 , Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱 2014年 10期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	绿色荧光蛋白; LILRB5; 单核细胞; 慢病毒; 转染;
【英文关键词】	GFP; LILRB5; monocyte; lentivirus; transfection;
【摘要】	目的构建天然免疫分子LILRB5的慢病毒表达载体,获得稳定转染LILRB5的单核细胞系。方法将LILRB5构建入真核表达载体pEGFP-flag,瞬时转染293T细胞系,通过免疫荧光和流式细胞术检测LILRB5-GFP和LILRB5-flag在293T细胞中的表达。构建慢病毒表达载体pHR-LILRB5,与p8.91和pMD共同转入293T细胞,产生标记有绿色荧光的LILRB5慢病毒,感染单核细胞系THP-1后通过流式细胞术检测LILRB5的表达。结果测序显示真核表达载体pEGFP-LILRB5-flag的序列与预期相符,瞬时转染pEGFP-LILRB5-flag的293T细胞可检测到绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术检测显示LILRB5-flag在细胞膜表面有表达;构建亚克隆慢病毒载体pHR-LILRB5,经测序验证后,转染293T细胞,产生LILRB5的慢病毒,并感染THP-1细胞,流式细胞术检测LILRB5在THP-1细胞稳定表达。结论构建LILRB5的慢病毒载体,通过LILRB5慢病毒感染建立LILRB5的稳转THP-1细胞系。
【英文摘要】	Objectives To construct a lentivirus vector containing the innate immune receptor LILRB5 and to obtain monocytes stably transfected with LILRB5. Methods LILRB5 was subcloned into the expression vector pEGFP-flag,which was then transiently transfected into 293 Tcells.The expression of LILRB5-GFP and LILRB5-flag was detected in293 Tcells transiently transfected with pEGFP-LILRB5-flag using immunofluorescence and flow cytometry(FCM).The lentivirus vector pHR-LILRB5 was constructed and co-transfected into 293 T...
【基金】	国家自然科学基金项目(No.81101605,81172792); 山东省自然科学基金项目(No.ZR2010HQ034,ZR2009CL014); 山东省科技发展计划项目(No.2010GSF10210); 山东省医药卫生科技发展计划项目(No.2011QZ021); 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目(No.BS2009YY008)
【更新日期】	2014-12-30
【分类号】	R373
【正文快照】	***白细胞免疫球蛋白样受体B5(leukocyte immuno-globulin-like receptor B5,LilrB5),又称白细胞免疫球蛋白样受体8(leukocyte immunoglobulinlikereceptor8)、CD85c,是NK受体(一组紧密连锁的基因群)成员之一。NK细胞受体主要包括3个家族成员,它们分别是KIRs受体家族,KLRs受体?

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