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杜氏利什曼原虫无鞭毛体表达抗原的Western blot和MALDI-TOF/TOF分析  
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【英文篇名】 Identification of the specific antigen expressed by Leishmania donovani amastigotes
【下载频次】 ★★★★☆
【作者】 王健; 关望; 张仁刚; 张洁; 敬保迁;
【英文作者】 WANG Jian; GUAN Wang; ZHANG Ren-gang; ZHANG Jie; JING Bao-qian; Department of Microbiology; Dazhou Vocational and Technical College; Institute of Immunology and Molecular Biology; North Sichuan Medical College;
【作者单位】 达州职业技术学院微生物学教研室; 川北医学院免疫学与分子生物学研究所;
【文献出处】 中国病原生物学杂志 , Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱 2014年 02期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 杜氏利什曼原虫; 免疫蛋白质组; 感染免疫;
【英文关键词】 Leishmania donovani; immunoproteomics; immunity from infection;
【摘要】 目的鉴定杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达抗原。方法培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化无鞭毛体,其总蛋白经2-DE电泳后以小鼠抗杜氏利什曼原虫无鞭毛体血清进行Western blot,对前鞭毛体与无鞭毛体特异表达抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定。重组表达无鞭毛体特异表达抗原编码基因,以Western blot法对重组蛋白进行鉴定。结果等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现680~742个蛋白点,Western blot及MALDI-TOF/TOF-MS分析甘油醛3-磷酸脱氢酶与延伸因子2为杜氏利什曼原虫前鞭毛体特异表达抗原,核苷二磷酸激酶为无鞭毛体特异表达抗原。重组核苷二磷酸激酶编码基因表达产物经Western blot证实为杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达强抗原。结论杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体抗原表达存在差异,核苷二磷酸激酶为杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达强抗原。
【英文摘要】 Objective To identify the specific antigen expressed in Leishmania donovani amastigotes. Methods The promastigotes of L.donovani were cultured and transferred into axenic amastigotes in vitro.The total proteins of promastigotes and axenic amastigotes were separated using two-dimensional electrophoresis(2-DE)in a broad pI range(3-10).Proteins were identified by Western blotting with mouse serum against L.donovani amastigotes.Antigens specifically expressed by promastigotes and axenic amastigotes were analyze...
【基金】 国家自然科学基金项目(No.30872213); 四川省应用基础项目(No.2008GY0088-1)
【更新日期】 2014-06-19
【分类号】 R382.22
【正文快照】 利什曼病目前在全世界90个国家流行[1],我国的四川、甘肃及新疆等地区也时有发生[2],其感染致病的分子机制和保护性免疫性质至今仍不十分清楚,缺乏确切有效的免疫诊断与免疫预防措施[3]。利什曼原虫感染人体后,前鞭毛体侵入巨噬细胞或树突状细胞,转化成无鞭毛体并迅速增殖,一方

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