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芯片电泳在免核酸提取PCR产物分析中的应用  
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【英文篇名】 Application of chip electrophoresis in extraction of PCR products with free nucleic acid extraction reagents
【下载频次】 ★★★
【作者】 雷秀霞; 李卓然; 梁广铁; 龙幼敏; 陈英姿; 张小精; 王秋平;
【英文作者】 LEI Xiu-xia; LI Zhuo-ran; LIANG Guang-tie; LONG You-min; CHEN Ying-zi; ZHANG Xiao-jing; WANG Qiu-ping; Guangzhou First People′s Hospital;
【作者单位】 广州市第一人民医院检验科; 南方医科大学医学影像系;
【文献出处】 中华医院感染学杂志 , Chinese Journal of Nosocomiology, 编辑部邮箱 2014年 09期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 芯片电泳; 新德里金属酰胺酶阳性细菌; 免核酸提取试剂;
【英文关键词】 Chip electrophoresis; New Delhi metallo lactamase-positive bacteria; Free nucleic acid extraction reagent;
【摘要】 目的探讨两种免核酸提取试剂联合应用DNA芯片电泳是否能快速、准确地用于新德里金属酰胺酶(NDM-1)阳性细菌的鉴定,了解该联合检测方法在流行病病原体快速鉴定中的应用价值,为流行性病原体的快速鉴定提供便捷手段。方法取1个(或0.1个)麦氏单位NDM-1(+)菌液加入免核酸提取试剂后直接进行PCR扩增,扩增产物用自制的芯片电泳进行产物分析,通过样品迁移时间与标准品比较精确计算出目的基因片段长度并大致推算产物的含量。结果两种免核酸提取试剂联合芯片电泳分析技术能快速、准确、高效地扩增出新德里金属酰胺酶NDM-1(+)细菌的目的基因片段,尤其湖南某厂家的试剂灵敏度更高。结论该联合检测方法在流行病尤其是突发性病原体的快速鉴定、监测中具有潜在的临床应用价值。
【英文摘要】 OBJECTIVE To explore the two kinds of free nucleic acid extraction reagents combined with DNA chip electrophoresis in rapid and accurate identification of New Delhi metallo-lactamase(NDM-1)-positive strains and understand the value of this combination method in rapid identification of prevalent pathogens so as to offer convenient means for rapid identification of prevalent pathogens.METHODS One(or 0.1)McNamara units NDM-1(+)bacterium was added to free nucleic acid extraction reagents for direct PCR amplific...
【基金】 广州市中医药科研基金资助项目(2010A6); 广州市中西医结合科研基金资助项目(2010A8)
【更新日期】 2014-06-26
【分类号】 R446.1
【正文快照】 对传统PCR而言,核酸提取是必不可少的步骤,核酸提取方法常涉及去垢剂裂解、蛋白酶处理、有机溶剂提取及乙醇沉淀等繁琐步骤,容易造成标本间互相污染、且耗时长。近年出现的一系列免核酸提取商品化DNA扩增试剂,为简化核酸分析带来了希望。本试验拟进一步联合应用具有高效精确计?

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