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紫红线茄转基因体系优化及SmARF8基因RNA干涉表达载体的遗传转化  
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【英文篇名】 Optimization of the Transgenic System and Genetic Transformation of SmARF8 Gene RNAi Vector in Red-purple Long Eggplant
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【作者】 包崇来; 杜黎明; 胡天华; 朱琴妹; 胡海娇; 毛伟海;
【英文作者】 BAO Chong-lai; DU Li-ming; HU Tian-hua; ZHU Qin-mei; HU Hai-jiao; MAO Wei-hai; The Institute of Vegetable; Zhejiang Academy of Agricultural Sciences;
【作者单位】 浙江省农业科学院蔬菜研究所;
【文献出处】 园艺学报 , Acta Horticulturae Sinica, 编辑部邮箱 2014年 06期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 茄子; 转基因; RNA干涉; 农杆菌;
【英文关键词】 eggplant; genetic transformation; RNA interference; Agrobacterium tumefaciens;
【摘要】 建立了以紫红线茄下胚轴为外植体的高效转基因体系。利用该方法,以获得茄子SmARF8基因RNA干涉转基因植株为目的,构建了以NPTⅡ基因为筛选标记的融合表达载体pCAMBIAI35S-2300-SmARF8-INT,并通过农杆菌介导,侵染茄子下胚轴外植体。含有2 mg·L-1吲哚乙酸,0.5 mg·L-1玉米素,25 mg·L-1卡那霉素和500 mg·L-1头孢氨苄的MS选择培养基可直接诱导外植体产生转基因分化苗,再生率达到80%。转基因苗继续生长并在不含激素的MS培养基上产生健壮根系,最终获得转基因株系。RT-PCR和qRT-PCR分析验证了T0代转基因株系中内源基因SmARF8被干涉后不表达或表达量降低,Southern blot分析显示选择的T0代转基因株系中存在1个T-DNA插入拷贝。以上研究结果表明利用建立的转基因体系SmARF8基因在茄子中被成功敲除。
【英文摘要】 A high efficient genetic transformation system was developed using hypocotyl explants for producing transgenic red-purple long eggplant(Solanum melongena L.). To generate SmARF8 gene RNAi transgenic eggplant plants,the binary vector pCAMBIAI 35S-2300-SmARF8-INT with the selectable marker gene neomycin phosphotransferase(NPTⅡ)was constructed and transformed into eggplant hypocotyl explants via Agrobacterium tumefaciens-mediated infection. Transgenic plantlets were induced on MS selective media containing 2 m...
【基金】 浙江省新品种选育重大科技专项(2012C12903); 浙江省农业科学院创新提升工程项目(2012R23Y01E01)
【更新日期】 2014-09-02
【分类号】 S641.1
【正文快照】 茄子(Solanum melongena L.)极易受黄萎病和青枯病等多种病害以及各种昆虫的危害,虽然部分野生种拥有天然抗性,但因连锁有害基因的存在,导致育性不兼容(Pratap et al.,2011)。随着分子生物学和基因工程的研究进展,可将各种重要调控基因转导到茄子中,快速改良品种(Mariashibuet

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