CMV IE2与myocardin协同诱导Mcl-1的转录促进心肌细胞存活

【摘要】 目的 观察CMV IE2与myocardin协同对心肌细胞内Mcl-1的转录活性影响。方法 ①体外培养新生鼠心肌细胞,构建抗凋亡标记物Mcl-1启动子驱动的荧光素酶报告基因质粒Mcl-1-luc和突变质粒Mcl-1-luc,将报告基因质粒和CMV IE2与myocardin共转染至心肌细胞,进行荧光素酶报告基因测定(luciferase reporter assay)。②新生鼠心肌细胞中共转染CMV IE2和(或)myocardin,RT-PCR和Western blotting检测Mcl-1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达量变化,观察CMV IE2与myocardin在心肌凋亡基因转录水平的协同作用。③新生鼠心肌细胞中转染CMV IE2和(或)myocardin,MTT测定,观察CMV IE2与myocardin对丝裂霉素处理下大鼠心肌细胞存活率的影响。结果 CMV IE2能够明显增加myocardin对Mcl-1启动子的转录活性,该作用至少部分依赖于Mcl-1启动子上的CArG序列;CMV IE2提高了myocardin诱导的心肌细胞中抗凋亡相关基因Mcl-1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达量;并提高丝裂霉素作用下心肌细胞的存活率。结论 本研究证实CMV IE2能够促进myocardin诱导的心肌细胞存活,而这种作用至少部分依赖于抗凋亡标志基因Mcl-1启动子上的CArG序列。更多还原