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【英文篇名】 |
Establishment of immortalized cell lines for genetic eye diseases |
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【下载频次】 |
★★★★★ |
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【作者】 |
王冬杰;
李宁东;
韩瑞芳; |
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【英文作者】 |
WANG Dong-Jie;
LI Ning-Dong;
HAN Rui-Fang;
the Clinical College of Ophthalmology;
Tianjin Medical University;
Tianjin Eye Hospital; |
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【作者单位】 |
天津医科大学眼科临床学院;
天津市眼科医院; |
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【文献出处】 |
眼科新进展
, Recent Advances in Ophthalmology, 编辑部邮箱
2014年 12期
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊 |
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【中文关键词】 |
遗传眼病;
EB病毒;
永生化B淋巴细胞系;
成纤维细胞;
原代培养; |
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【英文关键词】 |
genetic eye diseases;
EB virus;
immortalized B lymphoblastoid cell lines;
fibroblast;
primary culture; |
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【摘要】 |
目的通过遗传眼病患者的外周血或皮肤组织建立永生化细胞系,以保存其遗传资源。方法永生化B淋巴细胞系的建立:抽取患者静脉血,分离淋巴细胞,以EB病毒体外转化B淋巴细胞为类淋巴母细胞,利用环孢霉素A抑制T淋巴细胞RNA聚合酶Ⅱ活性,防止已转化B淋巴细胞因受到T淋巴细胞的攻击而退化,培养后建立永生化B淋巴细胞系;皮肤成纤维细胞原代培养:利用DispaseⅡ酶处理离体皮肤组织以分离表皮组织,将其余组织剪碎后贴瓶培养,成纤维细胞可从组织块爬出,生长成为细胞系。结果永生化B淋巴细胞系:共完成标本17例,成功建系15例,成功率88.2%;经过转化后B淋巴细胞悬浮生长,胞浆丰富、形态各异,聚集成团,可无限传代用于实验研究。皮肤成纤维细胞原代培养:共完成标本5例,成功建系3例,成功率60.0%;皮肤成纤维细胞贴壁生长,呈典型纺锤形,中间饱满,两边细长,50代以内增殖旺盛可用于实验研究。结论通过遗传眼病患者的外周血和皮肤组织可建立永生化B淋巴细胞系和皮肤成纤维细胞系以保存其全部遗传信息,为进一步研究相关遗传性眼病奠定物质基础。 |
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【英文摘要】 |
Objective To establish immortalized cell lines by acquiring peripheral blood or skin tissues from patients diagnosed with genetic eye diseases,so as to preserve the genetic resources. Methods Immortalized B lymphoblastoid cell lines establishment: The white cells from patients' peripheral blood were isolated,then EB virus was used to transform B lymphocytes into B lymphoblastoid cells,and cyclosporin A was used to inhibit T lymphocyte RNA polymerase Ⅱ activity for preventing the transformed B cells from T l... |
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【基金】 |
国家自然科学基金资助(编号:81170884)~~ |
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【更新日期】 |
2015-01-21 |
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【分类号】 |
R771 |
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【正文快照】 |
与遗传相关的眼科疾病不胜枚举,其中既有遵者,如Leber遗传性视神经病变(Leber’s hereditary循孟德尔法则,按照常染色体显性、常染色体隐性或optic neuropathy)[1-3]。伴随着分子遗传学的发展,与X连锁模式遗传的,如原发性视网膜色素变性(reti-遗传性眼病相关的致病基因陆续被发 |
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