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产外切葡聚糖酶真菌的筛选鉴定及毕赤酵母中的表达  
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【英文篇名】 Screening and identification of exo-1,4-β-D-glucannase-producing fungi, and its expression in Pichia pastoris
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【作者】 唐自钟; 刘姗; 韩学易; 晋海军; 陈惠; 刘默洋; 单志; 吴琦;
【英文作者】 TANG Zi-Zhong; LIU Shan; HAN Xue-Yi; JIN Hai-Jun; CHEN Hui; LIU Mo-Yang; SHAN Zhi; WU Qi; College of Biology and Science; Sichuan Agricultural University; Department of Biological and Chemical Engineering; Panzhihua University;
【作者单位】 四川农业大学生命科学与理学院; 攀枝花学院生物与化学工程学院;
【文献出处】 微生物学通报 , Microbiology China, 编辑部邮箱 2014年 04期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 黑曲霉Asp-524; 外切葡聚糖酶; 毕赤酵母; 菌种鉴定;
【英文关键词】 Aspergillus niger Asp-524; Exoglucanase; Pichia pastoris; Strain identification;
【摘要】 【目的】外切葡聚糖酶是纤维素酶组分中一类对结晶纤维素有降解作用的酶类,如何提高外切葡聚糖酶活力是研究的关键问题。【方法】从筛选鉴定得到的一株产外切葡聚糖酶酶活较高的黑曲霉Asp-524菌株出发,通过PCR技术克隆得到外切葡聚糖酶基因序列,生物学信息分析后,构建了毕赤酵母诱导型表达载体,实现了该基因在毕赤酵母中的成功表达。【结果】抗性筛选得到的阳性转化子,用终浓度为1%甲醇诱导5 d后,酶活达到4.74 U/mL。酶学性质分析显示重组外切葡聚糖酶最适pH为5.0,pH稳定性分析显示在pH为4.0-6.0范围内相对稳定,酶活能保持在最高酶活力的80%以上,最适反应温度为50°C,经60°C保温1 h后,酶活仍能保持80%以上。【结论】结果说明该外切葡聚糖酶具有较好的热稳定性和pH稳定性,这一研究为纤维素酶的实际应用奠定了一定基础。
【英文摘要】 [Objective] Exoglucanases is a class of cellulase which could degradation crystalline cellulose. Nowadays, how to improve the exoglucanase activity is of importance. [Methods] In this study, strain ASP-524, possessing higher level of cellobiohydrolase, was identified as Aspergillus niger. The cbhB gene was cloned from strain ASP-524, and expressed in Pichia pastoris GS115. [Results] After the induction of 1% methanol for 5 d, the expression strain reached a cellulase activity of 4.74 U/mL. The recombinant e...
【基金】 四川省科技厅科技支撑项目(No.2008Z0150)
【更新日期】 2014-07-01
【分类号】 Q55
【正文快照】 随着社会的高速发展,在食品加工过程中,食品添加剂的可靠性等食品安全问题越来越受到人们的关注,纤维素酶作为一种蛋白酶类是安全可食用的食品添加剂,其在榨汁及蔗糖的生产中应用较广,同时纤维素酶在扩大食品工业原料和植物原料的综合利用,提高原料利用率,净化环境和开辟新能源

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