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人乳头瘤病毒16型E7密码子优化后的原核表达及免疫原性研究  
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【英文篇名】 Prokaryotic expression and immunogenicity of human papillomavirus type-16 E7 with codon optimization
【下载频次】 ★★
【作者】 李菁华; 史红艳; 韩放; 逯茵茵; 徐国全; 于丽; 孙延波;
【英文作者】 LI Jing-hua; SHI Hong-yan; HANG Fang; LU Yin-yin; XU Guo-quan; YU Li; SUN Yan-bo; Department of Pathogenobiology; Norman Bethune College of Medicine; Jilin University;
【作者单位】 吉林大学白求恩医学部基础医学院病原生物学系; 大庆市红岗区人民医院;
【文献出处】 微生物学免疫学进展 , Progress in Microbiology and Immunology, 编辑部邮箱 2014年 02期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 人乳头瘤病毒16型; 原核表达; 多克隆抗体;
【英文关键词】 Human papillomavirus type-16; Prokaryotic expression; Polyclonal antibody;
【摘要】 目的构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7基因密码子优化后的原核表达系统,通过特异性抗体制备评价E7融合蛋白的免疫原性。方法人工合成优化后的HPV16 E7基因,利用特异引物扩增HPV16 E7基因。将E7基因连接至原核表达载体构建重组表达质粒pMAl-c2X-E7,转化至感受态细胞DE3后,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表达产物E7融合蛋白。纯化后的E7融合蛋白免疫动物,采用ELISA检测动物血清效价。结果 E7基因PCR产物的测序结果与优化后的目的基因序列比对一致。表达的E7融合蛋白经SDS-PAGE分析表明:在相对分子质量50 000处有特异性表达带,与预期相符。以E7融合蛋白制备的多克隆抗体其血清效价可达1∶64 000。结论成功构建的重组表达质粒pMAl-c2X-E7可有效表达MBP-E7融合蛋白,E7融合蛋白具有良好的免疫原性。
【英文摘要】 Objective To construct a prokaryotic expressing system that harbors human papillomavirus type-16( HPV16) E7 gene with codon optimization and to evaluate the immunogenicity of fusion protein E7 through preparation of specific antibodies. Methods HPV16 E7 gene with codon optimization was artificially synthesized and amplified by using specific primers. E7 gene was cloned into prokaryotic expressing vector to construct recombinant expressing plasmid pMAl-c2X-E7. After transfection of pMAl-c2X-E7 to DE3 compete...
【基金】 吉林省科技厅资助课题(吉林省科技发展计划项目:应用基础200705374)
【更新日期】 2014-08-18
【分类号】 R392;R737.33
【正文快照】 人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)属乳多空病毒科乳头瘤病毒属,是由DNA核心和蛋白衣壳组成的无包膜病毒。HPV的早期区(E)基因编码与病毒复制、转录调控、翻译和细胞转化等有关的蛋白[1]。HPV只在特定组织部位感染和复制,即皮肤和黏膜组织。子宫颈的鳞状上皮与柱状上皮的

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