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一种适用于RAPD分析的微量山茶DNA提取方法的建立  
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【英文篇名】 Establishment of a DNA Extraction Method Suitable for RAPD Analysis of Trace Arnounts of Camellia japonica L.
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【作者】 范晶; 李仲芳; 高明辉; 伏秦超;
【英文作者】 Fan Jing; Li Zhongfang; Gao Minghui; Fu Qinchao; College of Life Science; Leshan Normal University; College of Life Science and Chemistry; Tianshui Normal University;
【作者单位】 乐山师范学院生命科学学院; 天水师范学院生命科学与化学学院;
【文献出处】 生物技术通报 , Biotechnology Bulletin, 编辑部邮箱 2014年 12期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 DNA提取; RAPD; 山茶; 改良CTAB方法;
【英文关键词】 DNA extraction; RAPD; Camellia japonica L.; Improved; CTAB protocol;
【摘要】 为建立一种满足RAPD-PCR分析的简便且高产率微量山茶基因组DNA提取方法,探索了在无液氮条件下,采用简化试验步骤的改良CTAB、SDS和Triton X-100方法分别提取山茶新鲜和干燥叶片DNA,通过光谱扫描和测定DNA在波长230 nm,260 nm和280 nm时的吸光度,比较不同DNA提取方法、材料保存方法以及材料用量对DNA提取效率的影响。结果表明,干燥叶片比新鲜叶片更适合作为DNA提取材料,改良CTAB法在提取干燥山茶DNA时纯度和产率较理想,其A260/A280值为1.595-1.736,每克叶片可得到230-295μg DNA,高质量DNA经RAPD-PCR扩增可获得清晰扩增条带。100 mg干燥山茶叶片适合获得高纯度和高产率的DNA,增加材料用量可增大DNA总量,但也增加了DNA中杂质含量。
【英文摘要】 To explore a simple and high yield method for preparing DNA suitable for RAPD analysis, trace fresh and dried leaves of Camellia japonica L. were used as materials. Moreover, the improved CTAB, SDS and Triton X-100 methods without using liquid nitrogen were compared. The efficiencies of different DNA extraction methods, the effects of material preservation and material amounts on DNA qualities were compared based on the absorbance spectrum and ratio of absorbance at 230 nm, 260 nm and 280 nm by Ultraviolet ...
【基金】 乐山师范学院科研项目(Z1201); 乐山师范学院峨眉山生物多样性保护与利用研究所科研项目(12S01)
【更新日期】 2014-12-30
【分类号】 S685.14
【正文快照】 山茶(Camellia japonica L.)属于山茶科山茶属常绿灌木,是原产于中国的珍贵花卉,在中国十大名花中排名第七,具有很高的景观价值,广泛应用于园林绿化、室内盆栽、立体景观和插花艺术。我国山茶主要集中在云南、四川、广西和广东等地,川茶花分布于四川盆地,品种繁多,占据了全国山

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