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河豚毒素DNA适配子的制备及应用  
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【英文篇名】 Preparation and Application of Tetrodotoxin DNA Aptamer
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【作者】 邵碧英; 陈彬; 陈文炳; 杨方; 缪婷玉; 彭娟;
【英文作者】 SHAO Bi-ying; CHEN Bin; CHEN Wen-bing; YANG Fang; MIAO Ting-yu; PENG Juan; Fujian Provincial Key Laboratory of Inspection and Quarantine Technology Research; Center of Inspection and Quarantine Technology; Fujian Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;
【作者单位】 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心; 福建省检验检疫技术研究重点实验室;
【文献出处】 食品科学 , Food Science, 编辑部邮箱 2014年 24期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  中国期刊方阵  CJFD收录刊
【中文关键词】 河豚毒素; 适配子; 荧光染料; 检测;
【英文关键词】 tetrodotoxin; aptamer; fluorochrome; detection;
【摘要】 人工合成78个碱基的随机ss DNA文库,采用指数富集配基的系统进化技术与诱变聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)结合的方法,通过筛选富集、克隆、测序,获得了与河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)特异结合的单克隆DNA适配子A3。DNA适配子A3的二级结构主要为茎环结构,与TTX的亲和力为1.254。对适配子和TTX结合的磷酸盐缓冲液p H值、荧光染料结合时间进行优化,结果表明,最适p H值为7.5,最佳结合时间为10 min。建立的快速筛选检测TTX的DNA适配子-荧光染料法对TTX的检出限为10-6 mo1/L。
【英文摘要】 A 78-mer ss DNA library was synthesized in vitro. The tetrodotoxin (TTX) specific monoclonal DNA aptamer A3 was prepared using systematic evolution of ligands by exponential enrichment(SELEX) combined with mutagenic PCR by screening, enrichment, cloning and sequencing. The secondary structure of the DNA aptamer A3 mainly contained stem ring structure, and the affinity for tetrodotoxin was 1.254. The PBS buffer p H and fluorochrome-binding time were optimized. The results showed that the optimum p H was 7.5 ...
【基金】 国家质检总局科研项目(2010IK145;2014IK104)
【更新日期】 2015-02-09
【分类号】 Q78
【正文快照】 The?results?showed?that?the?optimum?p H?was?7.5?and?the?best?binding?time?was?10?min.?As?a?result,?a?DNA?aptamer-fluorochrome?method?for?rapidly?screening?and?detecting?tetrodotoxin?was?developed?with?a?detection?limit?of?10-6?mo1/L.河豚毒素(tetrodotoxin,

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