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应用PCR技术扩增细菌16S rRNA快速诊断肝硬化SBP的分析
【摘要】 目的 建立PCR技术扩增细菌16S rRNA的快速诊断肝硬化自发性腹膜炎的实验方法并探讨其临床应用价值。方法以细菌16S rRNA基因为靶序列,利用计算机软件Primer Express设计一对通用引物UP1和UP2,建立快速诊断肝硬化自发性腹膜炎的PCR实验方法;同时采用该方法检测60例肝硬化患者的腹水中的细菌DNA情况,并比较PCR方法与腹水培养法的灵敏度和特异度等。结果用引物UP1、UP2对12个不同菌株进行PCR扩增,均得到996bp左右长度的DNA片段,敏感性实验表明,用UP1、UP2引物进行的PCR扩增最低可检测出10pg/ml。对60例肝硬化腹水标本进行PCR扩增,阳性率为30.0%(18/60),明显高于同期腹水细菌培养阳性率仅为6.7%(4/60),二者比较有显著性差异(x~2=8.625,P<0.05)。结论PCR法优于腹水培养,其阳性率、灵敏度、特异度均较高,具有早期、快速诊断自发性细菌性腹膜炎的重要的临床应用价值。
【关键词】 肝硬化；
自发性细菌性腹膜炎；
16S rRNA基因；
聚合酶链反应；
腹水培养；
【基金】 温州市卫生局计划项目基金(2013A07)
- 【文献出处】 浙江临床医学 ,Zhejiang Clinical Medical Journal , 编辑部邮箱 ,2014年11期
- 【分类号】R440