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拟南芥蛋白激酶SnRK2.6的原核表达、纯化及活性分析

Prokaryotic Expression,Purification and Activity Analysis of Protein Kinase SnRK2.6 in Arabidopsis thaliana

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【作者】 杨凤博王鲜萍李坤

【Author】 YANG Feng-bo;WANG Xian-ping;LI Kun;Key Laboratory of Plant Stress Biology,College of Life Science,Henan University;

【机构】 河南大学生命科学学院植物逆境生物学重点实验室

【摘要】 从哥伦比亚生态型拟南芥(Arabidopsis thaliana Columbia 0)中克隆SnRK2.6[SNF1(sucrose non-fermenting-1)-related protein kinase 2.6]的完整编码序列(coding sequence,CDS),构建该基因的原核表达载体,将其转化BL21(DE3),经表达纯化得到SnRK2.6蛋白。激酶活性分析发现,原核表达纯化的SnRK2.6有自磷酸化和磷酸化MBP(myelin basin protein)的活性,为后续试验分析SnRK2.6的功能奠定基础。

【Abstract】 The whole coding sequence of SnRK2.6 [SNF1(sucrose non-fermenting-1)-related protein kinase 2.6]was cloned from Arabidopsis thaliana ecotype Columbia 0.The prokaryotic expression vector of the gene was constructed and transformed into Escherichia coli strain BL21(DE3)to obtain SnRK2.6protein by induction and purification.By activity analysis,the purified SnRK2.6had both autophosphorylation activity and phosphorylation activity of the myelin basic protein(MBP)substrate.This study lays the foundation for further study of the function of SnRK2.6.

【关键词】 原核表达纯化蛋白激酶脱落酸
【Key words】 prokaryotic expressionpurificationprotein kinaseABA
【基金】 国家自然科学基金项目(31070239)
  • 【文献出处】 河南农业科学 ,Journal of Henan Agricultural Sciences , 编辑部邮箱 ,2014年10期
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】4
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