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针对PKM2多位点RNAi质粒载体的构建和筛选  
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【英文篇名】 Construction of shRNA Expression Vectors Targeting several sites of PKM2
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【作者】 王润秀; 钟悦; 刘金英; 吴小云; 谢富华;
【英文作者】 WANG Run-xiu; ZHONG Yue; LIU Jin-ying; WU Xiao-yun; XIE Fu-hua; Dept.of Nephrology; the First Affiliated Hospital; Gannan Medical University; Teaching Center of analysis and testing; Dept.of Biochemistry and Molecular Biology;
【作者单位】 赣南医学院第一附属医院肾内科; 赣南医学院分析与检测实验教学中心; 赣南医学院生物化学与分子生物学教研室;
【文献出处】 赣南医学院学报 , Journal of Gannan Medical University, 编辑部邮箱 2014年 03期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 M2型丙酮酸激酶; RNA干扰; 小发夹RNA; 乳腺癌;
【英文关键词】 PKM2; RNA interference; small hairpin RNA; breast cancer;
【摘要】 目的:构建针对M2型丙酮酸激酶(PKM2)基因3个可干扰序列设计小发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)载体,为下一步探索Ad-PKM2介导PKM2 RNAi对乳腺癌细胞作用及机制建立基础。方法:根据RNAi设计软件设计并合成3对shRNA模板序列,依次将它们克隆至pGenesil载体中构建重组质粒,通过MTT检测筛选出对乳腺癌细胞株MCF-7增殖效应影响最强的RNAi序列。结果:酶切鉴定和测序结果证实RNAi载体构建成功,均能高效感染MCF-7并抑制MCF-7细胞的增殖,pGenesil-PKM2-(1+2+3)的抑制能力最强。结论:针对PKM2多靶点RNAi载体成功构建,为下一步研究PKM2被沉默后细胞生物学行为的变化打下基础。
【英文摘要】 Objective: To construct a small hairpin RNA( shRNA) expression vector,mediated by recombinant adenovirus and targeting PKM2,and which will help for exploring the biological behavior change of breast cancer cells by means of knockingdown PKM2. Methods: Three pairs of templates of PKM2 shRNA were synthesized and cloned into the pGenesil system successfully. Then its effect on the proliferation of MCF-7 was detected by MTT. Results: pGenesil-PKM2 was constructed successfully,and also it repressed proliferation...
【基金】 国家自然科学基金项目(81160258); 江西省教育厅青年基金项目(GJJ09584); 江西省卫生厅科技项目(20092084)
【更新日期】 2014-09-04
【分类号】 R346
【正文快照】 乳腺癌是危害妇女健康的主要恶性肿瘤,其发生率和死亡率仅次于肺癌。在过去的20年里,我国乳腺癌的发生率以每年3%~4%的速度增长。目前临床上常用的治疗方法如手术、化疗、放疗等手段虽然可以使患者获得较高的生存率,但长期化疗其不良反应很大,对病人的生活质量、生活积极性造成

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