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罗氏沼虾野田村病毒中国株RT-LAMP-LFD快速检测方法的研究  
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【英文篇名】 Rapid Detection of Macrobrachium Rosenbergii Nodavirus Isolated in China by a Reverse-transcription Loop-mediated Isothermal Amplification Assay Combined with a Lateral Flow Dipstick Method
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【作者】 林锋; 刘莉; 郝贵杰; 曹铮; 盛鹏程; 吴颖蕾; 沈锦玉;
【英文作者】 LIN Feng; LIU Li; HAO Gui-jie; CAO Zheng; SHENG Peng-cheng; WU Ying-lei; SHEN Jin-yu; Key Laboratory of Healthy Freshwater Aquaculture; Ministry of Agriculture; Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries;
【作者单位】 浙江省淡水水产研究所农业部淡水健康养殖重点实验室;
【文献出处】 病毒学报 , Chinese Journal of Virology, 编辑部邮箱 2014年 05期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 罗氏沼虾野田村病毒; 环介导等温扩增技术; 侧向流层析试纸;
【英文关键词】 Macrobrachium rosenbergii Nodavirus; Loop-mediated isothermal amplification; Lateral flow dipstick;
【摘要】 罗氏沼虾白尾病(White tail disease,WTD)是流行于罗氏沼虾苗种阶段的重要疾病,该病病原被确定为罗氏沼虾野田村病毒(Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV),为了建立罗氏沼虾野田村病毒中国分离株(MrNV-chin)的便捷、灵敏、特异的分子诊断方法,本研究根据罗氏沼虾野田村病毒RNA2基因保守序列的6个区域设计了4条特异性引物和1条检测探针,将环介导等温扩增技术与侧向流层析试纸(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立了MrNV的RT-LAMP-LFD检测方法。结果表明,该方法的灵敏度是常规琼脂糖凝胶电泳的10倍;从核酸提取到检测结果判定仅需45min;反应特异性强,对其他虾类病毒WSSV、IHHNV、IMNV、TSV和YHV扩增结果均为阴性;操作简单,不需要复杂的仪器,在61℃水浴反应即可;利用LFD试纸显示结果,肉眼可直接观察判定。作为一种快速灵敏实用的分子诊断技术,该方法有利于罗氏沼虾白尾病的诊断与预防。
【英文摘要】 White coloration of the muscle of the giant river prawn(Macrobrachium rosenbergii)is a serious problem in China.The Macrobrachium rosenbergii Nodavirus(MrNV)has been confirmed to be the pathogen that causes this disorder.To develop a rapid,sensitive and specific technology for the detection of Macrobrachium rosenbergii Nodavirus isolated from China(MrNV-China),a reverse-transcription loopmediated isothermal amplification assay combined with a lateral flow dipstick(RT-LAMP-LFD)assay method is described.A set...
【基金】 农业部公益性行业专项(201103034); 湖州市科技攻关项目(2012GN08); 浙江省淡水养殖科技创新团队项目(2012R10026-11)
【更新日期】 2014-10-22
【分类号】 S945.41
【正文快照】 罗氏沼虾野田村病毒(Macrobrachium rosen-bergii Nodavirus,MrNV)主要危害罗氏沼虾淡化苗,导致病虾肌肉出现白斑、白浊或全身发白的特征,因而所引起的病症通常被称为罗氏沼虾白尾病(White tail disease,WTD),死亡率高达90%以上[1]。我国罗氏沼虾白尾病出现于1995年左右,在2001

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