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日本血吸虫核糖核酸酶T2的表达及其功能分析  
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【英文篇名】 Expression and characterization of RNase-T2 of Schistosoma japonicum
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【作者】 柯雪丹; 余传信; 宋丽君; 菊池三惠子; 平山谦二; 王玠; 殷旭仁; 金一; 沈双; 姚媛; 高玒; 高琪;
【英文作者】 KE Xue-dan; YU Chuan-xin; SONG Li-jun; MIHOKO Kikuchi; HIRAYAMA Kenji; WANG Jie; YIN Xu-ren; JIN Yi; SHEN Shuang; YAO Yuan; GAO Hong; GAO Qi; Department of Pathogen Biology; School of Medicine; Suzhou University; Jiansu Institute of Parasitic Diseases; Key Laboratory of Technology for Parasitic Disease Prevention and Control Ministry of Health; Department of Molecular Immunogenetics; Institute of Tropic Medicine; Nagasaki University; Japan;
【作者单位】 苏州大学基础医学系寄生虫学教研室; 江苏省血吸虫病防治研究所 卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室; 日本长崎大学热带医学研究所分子免疫遗传室;
【文献出处】 中国病原生物学杂志 , Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱 2013年 12期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 血吸虫; 日本; 核糖核酸酶T2; 表达; 功能分析; 免疫调节;
【英文关键词】 Schistosoma japonicum; RNase T2; expression; functional analysis; immunoregulation;
【摘要】 目的制备重组日本血吸虫核糖核酸酶T2蛋白(rSj RNase T2),并分析其生物学功能。方法根据编码RNase T2开放阅读的基因序列设计、合成一对5′端带有酶切位点的引物。采用PCR方法从质粒CP1412/PEU-GST中扩增编码RNase T2蛋白成熟肽的基因片段,亚克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒Sj RNase T2-pET28a。将重组表达质粒转化到E.coli BL21中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用镍螯合亲和层析胶在变性条件下纯化rSj RNase T2蛋白。纯化蛋白通过尿素浓度梯度透析的方法进行复性,制备可溶性rSj RNase T2。以酵母RNA为底物进行消化,采用琼脂糖凝胶电泳的方法检测rSj RNase T2酶活性。用纯化的rSj RNase T2免疫小鼠,采用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠血清特异抗体水平,观察其抗原性;采用检测Western blot抗rSj RNase T2抗体IgG与成虫可溶性虫抗原、成虫外分泌抗原、虫卵可溶性抗原和虫卵外分泌抗原的反应性,并观察Sj RNase T2在虫体中的分布。以rSj RNase T...
【英文摘要】 Objectives To prepare a recombinant Schistosoma japonicumribonuclease T2 protein(rSj RNase T2)and investigate its biological function. Methods A pair of primers with restriction sites was designed in accordance with the DNA sequence of the open reading frame encoding Sj RNase T2.The DNA fragment encoding the mature peptide of Sj RNase T2 was amplified from the plasmid DNA of CP1412/pEU-GST.This DNA fragment was subcloned into the expression plasmid pET28a(+)to construct the recombinant expression plasmid Sj...
【基金】 国家自然科学基金项目(No.30671833,30972581); 江苏省自然科学基金项目(No.BK2008110); 国家传染病重大专项(No.2012ZX10004220); 江苏省博士后科研工作站无锡市人力资源和社会保障局资助项目
【更新日期】 2014-04-23
【分类号】 R392
【正文快照】 血吸虫虫卵外分泌蛋白是参与血吸虫感染免疫调节的主要抗原成分,这些外分泌蛋白分子的特征是其N未端都带有引导蛋白分泌到细胞外的外分泌信号肽[1]。余传信等[2]采用信号序列捕捉方法(signal se-quence trapping method,SST)从日本血吸虫虫卵cD-NA库中筛选到一批带有信号肽的血

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