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应用不同表达载体表达欧洲型PRRSV ORF5蛋白的研究  
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【英文篇名】 Effects of different expression vector on the ORF5 gene of European-type PRRSV
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【作者】 孙文超; 任静强; 温树波; 赵权; 阎富龙; 刘昊; 陆飞; 靖杰; 鲁会军; 金宁一;
【英文作者】 SUN Wen-chao; REN Jing-qiang; WEN Shu-bo; ZHAO Quan; YAN Fu-long; LIU Hao; LU Fei; JING Jie; LU Hui-jun; JIN Ning-yi; College of Animal Science and Technology; JiLin Agricultural University; Military Veterinary Institute; Academy of Military Medical Science; College of Animal Science and Veterinary Medicine; Jilin University;
【作者单位】 吉林农业大学动物科技学院; 军事医学科学院军事兽医研究所; 吉林大学畜牧兽医学院;
【文献出处】 中国病原生物学杂志 , Journal of Pathogen Biology, 编辑部邮箱 2013年 11期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 欧洲型PRRSV; GP5蛋白; 原核表达; 信号肽;
【英文关键词】 European-type PRRSV; GP5 protein; prokaryotic expression; signal peptide;
【摘要】 目的构建多种欧洲型PRRSV GP5蛋白原核表达载体,并比较其在大肠埃希菌中的表达效率。方法参考GenBank发表的欧洲型PRRSV LV株(GenBank登录号:M96262)ORF5序列,通过序列分析,设计合成ORF5全基因序列扩增引物及信号肽缺失引物。构建原核表达质粒pET-28a-GP5、pET-28a-gGP5、pET-22b-GP5、pET-22b-gGP5、pET-32a-GP5、pET-32a-gGP5、pGEX-4T-GP5、pGEX-4T-gGP5,经IPTG诱导后采用SDS-PAGE电泳分析GP5蛋白在各个原核表达载体的表达情况。结果 pET-28a-gGP5、pET-22b-gGP5、pET-32a-gGP5均没有高效的表达出缺失信号肽的GP5蛋白,缺少信号肽的GP5蛋白在pGEX-4T-1载体中高效表达,目的蛋白分子质量单位为42ku,与理论值相符。没有缺失信号肽的GP5蛋白在pET-28a-GP5、pET-22b-GP5、pET-32a-GP5、pGEX-4T-GP5,均未得到高效表达。结论本实验构建的重组原核表达载体pGEX-4T-gGP5能在大肠埃希菌中高效表达欧洲型PRRSV...
【英文摘要】 Objective To improve the prokaryotic expressions of the GP5 gene of European-type PRRSV with different vectors. Methods In accordance with the genome sequences of European-type PRRSV LV strain in GenBank,two pair of primers were designed to amplify the ORF5sequence of PRRSV.The amplified GP5 and gGP5 genes were cloned and 8 recombinant plasmids were respectively constructed:pET-28a-GP5,pET-28a-gGP5,pET-22b-GP5,pET-22b-gGP5,pET-32a-GP5,pET-32a-gGP5,pGEX-4T-GP5,and pGEX-4T-gGP5. Results After induction with 1...
【基金】 科技部“863”项目(No.2011AA10A208); 吉林省科技发展计划重点资助项目(No.20090235)
【更新日期】 2014-03-21
【分类号】 S852.65
【正文快照】 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and re-spiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种高度传染病。本病以母猪的繁殖障碍和仔猪的呼吸道症状及高死亡率为特征[1,2]。该病于1987年在美国首次报道[3],之后迅速传播,已经遍及世界主要养猪国家,

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