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GST-HDAC4融合蛋白载体的构建及其蛋白表达  
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【英文篇名】 Construction of GST-HDAC4 Fusion Protein Vector and Its Protein Expression
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【作者】 邵阳光; 刘姣; 李丰;
【英文作者】 SHAO Yang-guang; LIU Jiao; LI Feng(Department of Cell Biology; Key Laboratory of Medical Cell Biology of Ministry of Education; College of Basic Medical Science; China Medical University; Shenyang 110001; China);
【作者单位】 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室; 教育部医学细胞生物学重点实验室;
【文献出处】 中国医科大学学报 , Journal of China Medical University, 编辑部邮箱 2013年 02期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 GST-HDAC4; 原核表达; 融合蛋白;
【英文关键词】 GST-HDAC4; prokaryotic expression; fusion protein;
【摘要】 目的构建人HDAC4蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达和纯化。方法用EcoRI单酶切pcDNA3.1-HDAC4质粒,得到hHDAC4全长编码序列,并将其克隆至原核表达载体pGEX-5X-1构建成新载体GST-HDAC4,经鉴定完全正确后转化大肠埃希菌BL21,通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并纯化获得目的蛋白。Western blot检测重组质粒的表达。结果酶切鉴定和测序结果显示,GST-HDAC4融合蛋白原核表达载体构建成功。考马斯亮蓝染色和Western blot结果显示,成功获得有生物活性的GST-HDAC4融合蛋白。结论成功构建了HDAC4原核表达载体,获得有生物活性的GST-HDAC4蛋白。
【英文摘要】 Objective To construct the prokaryotic expression vector of human HDAC4 protein and glutathione-S-transferase(GST) for protein expression and purification.Methods pcDNA3.1-HDAC4 was digested by EcoRⅠ,the hHDAC4 coding sequence was obtained and cloned into prokaryotic expression vector pGEX-5X-1 to generate novel vector GST-HDAC4.After identification of GST-HDAC4,Escherichia coli BL21 was transformed and induced by isopropyl-β-D-thiogalactoside(IPTG),and target protein was obtained after purification.The exp...
【基金】 国家自然科学基金资助项目(30900752,31271389)
【更新日期】 2013-03-22
【分类号】 R341
【正文快照】 Construction of GST-HDAC4 Fusion Protein Vector and Its Protein Expression组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylases,HDACs)是真核细胞中的一类重要蛋白酶,参与染色质的结构修饰和基因表达调控,在肿瘤的发生和发展中起重要作用[1]。通过组蛋白去乙酰化酶抑制剂(his-tone dea

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