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层析法纯化C群脑膜炎球菌多糖及其制备的多糖蛋白结合物的安全性和免疫原性  
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【英文篇名】 Purification of group C meningococcal capsular polysaccharide by chromatography as well as safety and immunogenicity of prepared polysaccharide-protein conjugate
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【作者】 王雪薇; 刘钰; 陈敬; 焦小玲; 王平; 张燕斌; 林海涛; 刘梅影;
【英文作者】 WANG Xue-wei; LIU Yu; CHEN Jing; JIAO Xiao-ling; WANG Ping; ZHANG Yan-bin; LIN Hai-tao; LIU Mei-ying; Beijing Vigoo Biological Co. LTD;
【作者单位】 北京微谷生物医药有限公司; 北京生物制品研究所有限责任公司;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2013年 12期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 C群脑膜炎球菌; 多糖; 阴离子交换层析; 结合物; 安全性; 免疫原性;
【英文关键词】 Group C meningococcus; Polysaccharide; Anion-exchange chromatography; Conjugate; Safety; Immunogenicity;
【摘要】 目的采用层析法纯化C群脑膜炎球菌多糖,以替代冷酚抽提法,并对制备的多糖蛋白结合物进行初步安全性和免疫原性评价。方法采用温和的表面活性剂去氧胆酸钠对C群脑膜炎球菌多糖进行前处理,并用Capto adhere和Capto DEAE阴离子交换凝胶柱串联,对多糖进行柱层析纯化,再通过脱盐去除残留的去氧胆酸钠,获得精制多糖。对缓冲液中的去氧胆酸钠浓度、缓冲液pH值、样品的前处理时间及离子交换流速进行优化,并对建立的层析纯化工艺进行放大,纯化3批多糖,按照《中国药典》三部(2010版)要求检测各项质控指标,并通过核磁共振-氢谱检测纯化后的多糖结构。将层析法和苯酚法纯化的多糖分别与破伤风类毒素结合,制备多糖蛋白结合物,对结合物进行异常毒性、小鼠急性毒性试验和免疫原性检测。结果经优化,确定缓冲液的去氧胆酸钠浓度为1.0%,pH值为8.0,样品前处理时间为6 h,离子交换流速为2.0 ml/min。放大工艺制备的3批C群脑膜炎球菌多糖各项检测指标均合格,多糖回收率均大于70%,明显高于苯酚法制备的多糖。核磁共振-氢谱显示,层析法与苯酚法纯化的多糖主要峰基本一致,层析法未改变多糖结构。层析法纯化的多糖制备的多糖蛋白结合物异常毒性...
【英文摘要】 Objective To purify group C meningococcal capsular polysaccharide by chromatography instead of cold phenol extraction and preliminarily evaluate the safety and immunogenicity of polysaccharide-protein conjugate prepared. Methods Group C meningococcal capsular polysaccharide was pre-treated with mild surfactant sodium deoxycholate and purified by anion-exchange chromatography with Capto adhere and Capto DEAE columns,from which residual sodium deoxycholate was removed by desalting. The sodium deoxycholate con...
【基金】 重大新药创制科技重大专项(2010ZX09401-303-3-08)
【更新日期】 2014-04-17
【分类号】 R392.1
【正文快照】 由脑膜炎奈瑟菌(脑膜炎球菌)引起的流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)在世界各国均有发生,目前仍是一种对人类,尤其是儿童具有严重危害的急性呼吸道传染病,病死率和致残率较高,接种疫苗是预防流脑的有效手段。荚膜多糖是流脑疫苗的主要有效成分,目前市销流脑疫苗有A群、A+C群、A+C+W1

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