鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA诊断试剂盒的研制-中国学术期刊网络出版总库

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鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA诊断试剂盒的研制

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【英文篇名】	Preparation of double antibody sandwich ELISA diagnostic kit for F1 antigen of Yersinia pestis
【下载频次】	★★★★☆
【作者】	常娅莉; 席仲兴; 吴智远; 徐秉臣; 彭林锋; 胡丽娜; 热娜; 雷刚; 韩少波; 张正雷; 卜培英; 袁浩嘉; 王秉翔;
【英文作者】	CHANG Ya-li; XI Zhong-xing; WU Zhi-yuan; XU Bing-chen; PENG Lin-feng; HU Li-na; RE Na; LEI Gang; HAN Shao-bo; ZHANG Zheng-lei; BU Pei-ying; YUAN Jia-hao; WANG Bing-xiang; Lanzhou Institute of Biological Products Co. Ltd;
【作者单位】	兰州生物制品研究所有限责任公司; 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心;
【文献出处】	中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2013年 11期期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	鼠疫耶尔森菌; F1抗原; 单克隆抗体; 酶联免疫吸附测定;
【英文关键词】	Yersinia pestis; F1 antigen; Monoclonal antibody(McAb); Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA;
【摘要】	目的研制鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA诊断试剂盒,并进行验证。方法用鼠疫菌F1抗原免疫家兔制备抗血清,经50%饱和硫酸铵盐析2次后,再经Sephacryl S-300凝胶柱层析纯化,作为包被抗体;制备鼠疫菌F1抗原单克隆抗体腹水,并进行纯化,用HRP标记单抗,作为酶标抗体;建立鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA检测方法,连续制备3批诊断试剂盒,并建立内部质控品。对试剂盒进行板内板间精密性、灵敏度、线性范围、特异性、重复性、准确性和稳定性验证。结果制备的试剂盒检测精密性参比品的板内变异系数为5.2%,板间变异系数为8.23%;试剂盒的线性范围为3.91~62.5 ng/ml,最低检测限为3.0 ng/ml;试剂盒检测鼠疫菌菌液的结果为阳性,而与近缘假结核耶尔森菌无交叉反应;试剂盒检测高、中、低3种浓度F1抗原含量的变异系数为4.54%~8.4%,回收率在104%~108%之间;试剂盒稳定性良好,有效期至少为1年。结论成功制备了鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA诊断试剂盒,为鼠疫的临床诊断及流行病学监测提供了一种快速检测手段,也为新型鼠疫组分疫苗F1抗原含量的检测提供了方法。
【英文摘要】	Objective To develop and verify a double antibody sandwich ELISA diagnostic kit for F1 antigen of Yersinia pestis. Methods Antisera were prepared by immunizing rabbits with F1 antigen of Y. pestis, subjected to salting out with50% ammonium sulfate, the purified by Sephacryl S-300 gle column chromatography and used as the coating antibody.The murine ascites containing monoclonal antibody(McAb)against F1 antigen was prepared, purified, labled with HRP and used as the enzyme-labeled antibody. Three batches of ...
【基金】	国家“863”课题(2006AA02Z461)
【更新日期】	2014-03-26
【分类号】	R378.61
【正文快照】	目前,鼠疫的诊断一直采用经典“四步检验”和血清学方法,以从标本中检出鼠疫菌作为诊断的“金标准”[1]。“四步检验”法存在操作费时、敏感性较低、受主观因素影响等缺点;作为诊断“金标准”的鼠疫菌培养法通常需2~3 d,再加上鉴定试验,得到结果的时间会更长,即使从标本中培养?

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