小鼠白细胞介素-17及其shRNA重组表达质粒的构建-中国学术期刊网络出版总库

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小鼠白细胞介素-17及其shRNA重组表达质粒的构建

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【英文篇名】	Construction and expression of shRNA plasmid for mouse interleukin-17
【下载频次】	★★★☆
【作者】	万俊丽; 李秋; 刘玮; 阳海平; 崔晶晶; 施静;
【英文作者】	WAN Jun-li; LI Qiu; LIU Wei; YANG Hai-ping; CUI Jing-jing; SHI Jing; Department of Nephrology and Immunology; Children's Hospital; Chongqing Medical University;
【作者单位】	重庆医科大学附属儿童医院肾脏免疫科; 重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所;
【文献出处】	中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2013年 11期期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	白细胞介素-17; 短发夹RNA; 原发性肾病综合征;
【英文关键词】	Interleukin-17(IL-17); Short hairpin RNA; Primary nephrotic syndrome(PNS;
【摘要】	目的构建小鼠白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)及其shRNA重组表达质粒。方法以小鼠脾脏细胞总RNA为模板,PCR扩增IL-17基因,并亚克隆至质粒pLVX-IRES-ZsGreen1,构建重组表达质粒pLVX-IL-17-IRESZsGreen1;设计并合成3对针对IL-17基因的shRNA序列和1对阴性对照shRNA序列,分别插入质粒pLVX-shRNA,构建重组干扰质粒pLVX-shRNA1、pLVX-shRNA2、pLVX-shRNA3和阴性对照质粒shRNAC,进行测序;用脂质体法将各重组干扰质粒分别与表达质粒共转染293T细胞,分为空白对照组、过表达组、shRNA1组、shRNA2组、shRNA3组和shRNAC组,经荧光定量PCR和ELISA法分别检测各组细胞中IL-17基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平。结果 PCR扩增获得500 bp的目的基因,IL-17重组表达质粒及其shRNA重组质粒经酶切及测序鉴定证明构建正确;重组表达质粒转染293T细胞48 h后可见绿色荧光表达;过表达组IL-17基因mRNA及蛋白表达水平均明显高于空白对照组(P均<0.05),shR...
【英文摘要】	Objective To construct the shRNA plasmid for mouse interleukin-17(IL-17). Methods IL-17 gene was amplified by PCR using the reversely transcribed product of RNA from spleen cells of BALB / c mice as a template,and subcloned into expression vector pLVX-IRES-ZsGreen1 to construct recombinant plasmid pLVX-IL-17-IRES-ZsGreen1. Three pairs of shRNA sequences targeting IL-17 gene and one pair of negative control shRNA sequence were designed and synthesized,then inserted into expression vector pLVX-shRNA to constr...
【基金】	国家自然科学基金资助项目(81070563)
【更新日期】	2014-03-26
【分类号】	R392.11
【正文快照】	白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)是Th17细胞分泌的一种多效性前炎性细胞因子,通过与效应细胞(如上皮细胞、内皮细胞)表面的受体结合,诱导多种集落刺激因子、趋化因子、细胞黏附分子的产生,这些细胞因子在免疫、炎症的不同阶段具有不同的作用[1]。研究发现,在干燥综合征、?

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