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伤寒Vi多糖柱层析纯化工艺的优化  
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【英文篇名】 Optimization of procedure for purification of typhoid Vi polysaccharide by column chromatography
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【作者】 黄镇; 王铭; 陆伟; 黄志伟; 王茜; 余晓书; 冯晓异; 者海燕; 江超;
【英文作者】 HUANG Zhen; WANG Ming; LU Wei; HUANG Zhi-wei; WANG Qian; YU Xiao-shu; FENG Xiao-yi; ZHE Hai-yan; JIANG Chao Yunnan Walvax Biotechnology Co.Ltd.; Kunming 650106; Yunnan Province; China;
【作者单位】 云南沃森生物技术股份有限公司;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2013年 04期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 伤寒; Vi多糖; 层析; 优化;
【英文关键词】 Typhoid; Vi polysaccharide; Chromatography; Optimization;
【摘要】 目的优化伤寒Vi多糖柱层析纯化工艺,以替代传统苯酚抽提、乙醇分级沉淀法。方法采用DEAE离子交换层析柱,分别在缓冲液(20 mmol/L Tris-Cl)pH值为6.0、7.0和8.0的条件下纯化1批伤寒Vi多糖粗糖,并与传统苯酚抽提、乙醇分级沉淀法进行比较。按《中国药典》三部(2010版)要求检测纯化样品的蛋白质含量、核酸含量、O-乙酰基含量、分子大小及内毒素含量,并计算样品的多糖回收率。采用优化的DEAE柱层析纯化工艺纯化3批伤寒Vi多糖粗糖,验证该工艺的稳定性。结果 DEAE离子交换柱缓冲液(20 mmol/L Tris-Cl)pH值为7.0和8.0时,可有效将伤寒Vi多糖的杂质与纯化产物分离,多糖回收率分别为36.52%和38.35%,明显高于传统工艺的多糖回收率(15.52%),且纯化产物的内毒素含量(10 EU/μg)明显低于传统工艺(200 EU/μg)。以优化工艺(pH 7.0)纯化3批伤寒Vi多糖粗糖获得的6批精糖的蛋白质含量、核酸含量、O-乙酰基含量、分子大小、内毒素含量及多糖回收率差异较小,标准偏差均小于5%。结论优化了伤寒Vi多糖柱层析的纯化工艺,该工艺稳定性良好,可替代传统苯酚抽提、...
【英文摘要】 Objective To develop a column chromatographic method for purification of typhoid Vi polysaccharide instead of traditional phenol extraction combined with ethanol fractionation.Methods One batch of crude typhoid Vi polysaccharide was purified by DEAE ion exchange chromatography using 20 mmol / L Tris-Cl as buffer at pH 6.0,7.0 and 8.0 respectively,serving traditional phenol extraction combined with ethanol fractionation as control.The purified Vi polysaccharide was determined for protein,nucleic acid,O-acety...
【更新日期】 2013-05-01
【分类号】 TQ461;R915
【正文快照】 伤寒是由伤寒沙门杆菌引起的一种急性肠道传染病,该病经肠道感染网状内皮细胞系统、肠道淋巴系统和胆囊而致急性全身性感染。我国自1998年洪涝灾害后,伤寒发病率逐渐升高。据2008年中国卫生部统计,伤寒或副伤寒的感染率为118/10万,病死率约为0.04/10万,该病是中国发病率前十位?

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