重组人β-神经生长因子在昆虫细胞中的表达、纯化及其生物学活性-中国学术期刊网络出版总库

中国学术期刊网络出版总库

关闭

重组人β-神经生长因子在昆虫细胞中的表达、纯化及其生物学活性

推荐 CAJ下载

PDF下载

【英文篇名】	Expression of recombinant human β-nerve growth factor in insect cells and purification and biological activity of expressed product
【下载频次】	★★★★★
【作者】	李佳楠; 王玲; 吕新凯; 吴红梅; 汤华东;
【英文作者】	LI Jia-nan; WANG Ling; LV Xin-kai; WU Hong-mei; TANG Hua-dong Technique Center of Wuhan Hiteck Biological Pharma Co.; Ltd; Wuhan 430056; Hebei Province; China;
【作者单位】	武汉海特生物制药股份有限公司技术中心; 江汉大学生命科学学院生物技术系;
【文献出处】	中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2013年 03期期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	神经生长因子; 杆状病毒表达系统; 昆虫细胞; 纯化; 生物活性;
【英文关键词】	Nerve growth factor(NGF); Baculovirus expression system; Insect cells; Purification; Biological activity;
【摘要】	目的在昆虫细胞中表达重组人β-神经生长因子(Recombinant humanβnerve growth factor,rhβ-NGF),并对表达产物进行纯化和生物学活性鉴定。方法构建rhβ-NGF杆状病毒表达质粒Bacmid+[rhβ-NGF],利用脂质体cellfectionⅡ将质粒转染至昆虫细胞Sf9中,用转染细胞的上清反复感染Sf9细胞,大量收获含目的蛋白的培养上清,利用离子交换层析和分子筛层析纯化rhβ-NGF,纯化产物经SDS-PAGE和Western blot分析,并通过鸡胚背根神经节培养法检测rhβ-NGF的生物学活性。结果重组表达质粒Bacmid+[rhβ-NGF]经测序证实构建正确;重组病毒感染的Sf9细胞可表达rhβ-NGF;纯化的rhβ-NGF蛋白经SDS-PAGE分析,可见相对分子质量约14 200的单一条带,纯度大于98%,能与兔抗人NGF单克隆抗体特异性结合,并能刺激神经节突起生长,其比活性约为600 000 AU/mg。结论成功在昆虫细胞中表达了有生物学活性的rhβ-NGF,为其大量制备奠定了基础。
【英文摘要】	Objective To express recombinant human β nerve growth factor(rhβ-NGF) in insect cells,purify the expressed product and determine its biological activity.Methods Recombinant plasmid Bacmid +[rhβ-NGF]was constructed and transfected to insect cell line Sf9 in mediation of liposome cellfection Ⅱ.Sf9 cells were repeatedly infected with the supernatant of transfected cells,of which the culture supernatant containing target protein was collected in a large quantity.The rhβ-NGF was purified by ion exchange and mole...
【更新日期】	2013-04-01
【分类号】	Q75
【正文快照】	神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)是最早发现的神经营养因子,为神经系统重要的生物活性分子之一。NGF由α、β、γ3个亚基组成,其活性部分主要是β亚基[1]。β-NGF在维持交感神经元的存活、促进受损神经纤维的修复、促进白细胞增生和分化等方面起着重要作用[2-3]。目前,?

xxx

【相似文献】

中国期刊全文数据库

中国优秀硕士学位论文全文数据库

中国博士学位论文全文数据库

中国重要会议论文全文数据库

中国重要报纸全文数据库

中国学术期刊网络出版总库

点击下列相关研究机构和相关文献作者，可以直接查到这些机构和作者被《中国知识资源总库》收录的其它文献，使您全面了解该机构和该作者的研究动态和历史。

【文献分类导航】从导航的最底层可以看到与本文研究领域相同的文献，从上层导航可以浏览更多相关领域的文献。

生物科学
　

分子生物学
　　

分子遗传学


	CNKI系列数据库编辑出版及版权所有：中国学术期刊(光盘版)电子杂志社中国知网技术服务及网站系统软件版权所有：清华同方知网(北京)技术有限公司其它数据库版权所有：各数据库编辑出版单位（见各库版权信息）京ICP证040431号互联网出版许可证新出网证（京）字008号

相似文献

文献分类导航