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重组汉逊酵母表达的乙型肝炎病毒表面抗原疏水层析图谱的峰形规律分析  
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【英文篇名】 Graph pattern of Hansenula polymorpha-derived hepatitis B surface antigen purified by hydrophobic interaction chromatography
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【作者】 许宁; 张德有; 马锐; 冯潇磊; 张旭; 杨旭琴; 李彩梅; 柳蔷; 沈永才; 李津;
【英文作者】 XU Ning; ZHANG De-you; MA Rui; FNEG Xiao-lei; ZHANG Xu; YANG Xu-qin; LI Cai-mei; LIU Qiang; SHEN Yong-cai; LI Jin Beijing Tiantan Biological Products Co.; Ltd; Beijing 100024; China;
【作者单位】 北京天坛生物制品股份有限公司; 北京生物制品研究所有限责任公司; 北京大学医学部基础医学院病原生物学系;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2013年 01期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 疏水层析; 汉逊酵母; 肝炎表面抗原; 乙型; 峰形;
【英文关键词】 Hydrophobic interaction chromatography(HIC); Hansenula polymorpha; Hepatitis surface antigen; B; Peak shape;
【摘要】 目的探讨疏水层析纯化重组汉逊酵母(Hansenula polymorpha,HP)表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)层析图谱与蛋白含量及HBsAg含量的相关性。方法采用疏水层析纯化8批HP-HBsAg小量试验样品和5批小量验证试验样品及5批酿酒酵母表达的HBsAg对照试验样品,采用Lowry法和电化学发光法(Electrochemiluminescentimmunoassay,ECLIA)分别检测纯化样品中蛋白含量和HBsAg含量,并计算HBsAg的回收率;通过几何法封闭紫外监测图谱特征峰图形,用数字求积仪采用积分法求出各封闭特征峰的图形面积,并进行分析;取小量验证试验1批样品的层析主峰和副峰收液进行电镜观察。结果 8批HP-HBsAg小量试验和5批HP-HBsAg小量验证试验HBsAg的平均回收率分别为70%和54%。HP-HBsAg疏水层析图谱由两部分构成:穿透峰和目标峰(HBsAg峰),目标峰可见高低不同的两个峰(主峰与副峰);对照图谱中有穿透峰和目标峰。对目标峰进行量化分析,主峰、副峰与目标峰的面积比值分别与其所对应的收集量、蛋白含量和HBsAg含量比值相关。电镜观察可见小量验证试验样品主峰收液中H...
【英文摘要】 Objective To investigate the relationship of graph pattern of Hansenula polymorpha(HP)-derived hepatitis B surface antigen(HBsAg) purified by hydrophobic interaction chromatography(HIC) to HBsAg and protein contents.Methods Eight batches of the HP-HBsAg samples for small-scale preparation,five batches of samples for small-scale verification test and five batches of Saccharomyces cerevisae(SC)-derived HBsAg as control were purified by hydropobic chromatography,and determined for protein and HBsAg contents by...
【基金】 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治国家科技重大专项(2012ZX10002002002)
【更新日期】 2013-01-31
【分类号】 R512.62
【正文快照】 乙型肝炎(简称乙肝)疫苗是预防乙型肝炎的有效有段。乙肝表面抗原(HBsAg)能在动物或人体内引起保护性抗体,其不仅能诱导体液免疫,还能诱导细胞免疫,是乙型肝炎疫苗的有效抗原。本实验参照酿酒酵母(Saccharomyces cerevisae,SC)表达HBsAg的纯化工艺,采用疏水层析[1-2]纯化重组汉

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