|
|
|
|
【英文篇名】 |
The expression of EV71 VP1 gene and preparation of its antiserum |
|
【下载频次】 |
★★★★★ |
|
【作者】 |
谢维欣;
武建明;
李杰;
方永志;
王洪梅;
何洪彬; |
|
【英文作者】 |
XIE Weixin1;
2;
WU Jianming2;
LI jie1;
FANG Yongzhi3;
WANG Hongmei2;
HE Hongbin1;
* 1.College of Life Science;
Northeast Agricultural University;
Harbin 150030;
China;
2.The Research Center of Dairy Cow;
Shandong Academy of Agricultural Science;
Jinan 250100;
3.Army Dog Training Troop of Jinan Military District; |
|
【作者单位】 |
东北农业大学生命科学学院;
山东省农业科学院奶牛研究中心;
济南军区军犬训练大队; |
|
【文献出处】 |
免疫学杂志
, Immunological Journal, 编辑部邮箱
2013年 01期
期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊 |
|
【中文关键词】 |
肠道病毒71;
VP1;
抗血清;
抗体效价; |
|
【英文关键词】 |
Enterovirus 71;
VP1;
Antiserum;
Antibody titer; |
|
【摘要】 |
目的克隆并表达重组肠道病毒71(EV71)VP1基因,进行抗血清的制备并检测抗血清效价。方法利用原核表达系统将PCR获得的VP1片段构建成原核表达载体pET32a(+)-VP1,诱导其表达VP1融合蛋白并利用包涵体纯化方法进行重组蛋白的纯化,将纯化的重组蛋白免疫新西兰兔制备VP1抗血清,ELISA检测抗体效价。同时构建真核表达载体,利用其在真核细胞中的瞬时表达检测抗血清的特异性。结果通过克隆获得VP1原核表达载体,IPTG诱导VP1蛋白表达并纯化,SDS-PAGE结果显示重组蛋白表达且纯化浓度较高,将重组蛋白乳化后免疫新西兰兔3次,取血检测抗血清的效价,ELISA结果显示抗体效价为1∶64 000,利用所构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-VP1表达VP1对抗血清进行检测,Western blot结果表明抗血清可较好的与VP1特异性结合。结论制备具有免疫原性的VP1蛋白及其效价较高的抗血清,为进一步研究抗EV71诊断方法、血清学诊断试剂盒及抗病毒疫苗的研制奠定基础。 |
|
【英文摘要】 |
EV71 is a main virus of hand-foot-moth disease,while VP1 has main antigenic determinant of EV71.In this study,we aimed to prepare VP1 antiserum and detect its titer by cloning and expressing recombinant VP1 gene.Firstly,the prokaryotic expression vector pET32a(+)-VP1 was constructed by using VP1 fragment from PCR product,and the recombinant protein expressed.Then the purified recombinant protein was used to immunize New Zealand rabbits for preparing VP1 antiserum.At the same time,a eukaryotic expression vec... |
|
【基金】 |
国家自然科学基金(31272586);
国家转基因重大专项(2009ZX08007-006B,2011ZX08007-002,2011ZX08008-004);
山东省青年自然科学基金项目(ZR2010ZR029);
山东省自然科学基金(ZR2010CM012);
济南市高校院所主创新计划(201004027) |
|
【更新日期】 |
2013-01-18 |
|
【分类号】 |
R373 |
|
【正文快照】 |
肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是导致手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)以及心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜炎等多种并发症的主要病原体之一,多发于5岁以下儿童,以1～3岁最为常见[1]。EV71属于小RNA病毒科肠道病毒属,病毒颗粒为二十面立体对称的球型结构,直径为24? |
|
| 【相似文献】 |
 |
中国期刊全文数据库 |
 |
|
|
中国优秀硕士学位论文全文数据库 |
|
|
|
中国博士学位论文全文数据库 |
|
|
|
中国重要会议论文全文数据库 |
|
|
|
中国重要报纸全文数据库 |
|
|
|
中国学术期刊网络出版总库 |
|
|
|
|
点击下列相关研究机构和相关文献作者，可以直接查到这些机构和作者被《中国知识资源总库》收录的其它文献，使您全面了解该机构和该作者的研究动态和历史。
|
|
【文献分类导航】从导航的最底层可以看到与本文研究领域相同的文献，从上层导航可以浏览更多相关领域的文献。
|
|
|
| 
推荐 
