中国学术期刊网络出版总库
  关闭
Tat融合蛋白表达载体TAT-OCT4的克隆化及蛋白表达研究  
   推荐 CAJ下载 PDF下载
【英文篇名】 Cloning of TAT fusion protein expression vector TAT OCT4 and its protein expression
【下载频次】 ★★☆
【作者】 王建军; 万志红; 赵平; 靳雪源; 谢国明; 辛绍杰;
【英文作者】 WANG Jian-jun1; 2; WAN Zhi-hong2; ZHAO Ping2; JIN Xue-yuan2; XIE Guo-ming2; XIN Shao-jie2 1Chinese PLA Medical School; Beijing 100853; China; 2Chinese PLA 302 Hospital; Beijing 100039;
【作者单位】 解放军医学院; 解放军第302医院;
【文献出处】 解放军医学院学报 , Academic Journal of Chinese PLA Medical School, 编辑部邮箱 2013年 08期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 OCT4蛋白; 诱导性多能干细胞; 蛋白转导结构域; 载体构建;
【英文关键词】 OCT4 protein; inducible pluripotent stem cells; protein transduction domain; vector construction;
【摘要】 目的构建重组表达载体TAT-OCT4,在E.coli BL21中高效表达并纯化融合蛋白。为进一步通过蛋白转导方式诱导多能干细胞提供物质基础。方法经RT-PCR获得编码人OCT4的全基因序列,连接到原核表达载体TAT-V2上,得到重组表达载体TAT-OCT4,转化大肠埃希菌,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导TAT-OCT4融合蛋白的表达。表达产物用SDS-PAGE鉴定,亲和层析柱纯化融合蛋白,并应用Western Blot检测蛋白的特异性,应用免疫荧光检测融合蛋白转导人皮肤成纤维(human skin fibroblasts,HSF)细胞的效果。结果成功构建了TAT-OCT4融合蛋白的原核表达载体,在诱导下获得了高效表达并纯化了融合蛋白,Western Blot鉴定正确。免疫荧光提示融合蛋白可快速转导入HSF细胞内。结论 TAT-OCT4融合蛋白可以安全,高效地转导入HSF细胞中。
【英文摘要】 Objective To provide the material foundation for inducing pluripotent stem cells through protein transduction by constructing the recombinant expression vector TAT-OCT4 which can highly express and purify fusion protein in E.coli BL21.Methods The coding human OCT4 gene sequence was obtained by RT-PCR amplification and linked to the prokaryotic expression vector TAT-V2 for the construction of recombinant vector TAT-OCT4.E.coli BL21 was transformed into TAT-OCT4.Expression of TAT-OCT4 was induced with IPTG an...
【基金】 军队“十二五”重大课题(BWS11J075)~~
【更新日期】 2013-09-12
【分类号】 R329
【正文快照】 2006年,Takahashi和Yamanaka[1]将OCT4、sox2、c-Myc和klf4基因转染小鼠胚胎成纤维(mouseemb-ryonic fibroblast,MEF)细胞,使其重编程为类似胚胎干细胞的一种细胞类型,即诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)。已有研究发现,iPSCs可分化为多种组织细胞,如造血

xxx
【相似文献】
中国期刊全文数据库
中国优秀硕士学位论文全文数据库
中国博士学位论文全文数据库
中国重要会议论文全文数据库
中国重要报纸全文数据库
中国学术期刊网络出版总库
点击下列相关研究机构和相关文献作者,可以直接查到这些机构和作者被《中国知识资源总库》收录的其它文献,使您全面了解该机构和该作者的研究动态和历史。
【文献分类导航】从导航的最底层可以看到与本文研究领域相同的文献,从上层导航可以浏览更多相关领域的文献。

医药、卫生
  基础医学
   人体形态学
    人体组织学
  
 
  CNKI系列数据库编辑出版及版权所有:中国学术期刊(光盘版)电子杂志社
中国知网技术服务及网站系统软件版权所有:清华同方知网(北京)技术有限公司
其它数据库版权所有:各数据库编辑出版单位(见各库版权信息)
京ICP证040431号    互联网出版许可证 新出网证(京)字008号