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杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN 1622-CAT的构建

Construction of transformation vector pUC-chlN 1622-CAT for chloroplast of Dunaliella salina

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【作者】 张汇征崔柳青潘卫东薛乐勋

【Author】 ZHANG Huizheng1),CUI Liuqing2),PAN Weidong1),XUE Lexun3) 1)Department of Immunology and Microbiology,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001 2)College of Bioengineering,Henan University of Technology,Zhengzhou 450001 3)Laboratory for Cell Biology,Department of Bioengineering,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001

【机构】 郑州大学微生物学与免疫学教研室河南工业大学生物工程学院郑州大学生物工程系细胞生物学研究室

【摘要】 目的:构建杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-氯霉素乙酰转移酶(CAT)。方法:以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN基因为同源片段,以CAT抗性基因为选择标记,构建盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN1622-CAT,并通过电击法转入野生型盐藻细胞,筛选转化藻株。结果:在氯霉素浓度为300mg/L的选择压力下,野生型盐藻10d左右死亡,转化藻仍正常生长,得到表达氯霉素抗性的盐藻转化株。结论:以chlN基因作为同源片段构建盐藻叶绿体转化载体是可行的。

【Abstract】 Aim:To construct the transformation vector pUC-chlN 1622-chloramphenicol acetyltransferase(CAT) for the chloroplast of Dunaliella salina(D.salina).Methods:By using CAT gene as selective marker,and the chlN,one of light-independent protochlorophyllide reductase genes,being used as homologous segment,a transformation vector pUC-chlN 1622-CAT for the chloroplast of D.salina was constructed,which was transferred into the cells of normal D.salina,using the electroporation.Results:The transformants of D.salina survived under the selection pressure of chloramphenicol at 300 mg/L,while the wild type cells died at about 10 days after electroporation.The transformants had resistance to chloramphenicol.Conclusion:It is available to construct transformation vector for D.salina chloroplast using the chlN gene as homologous segment.

【基金】 国家自然科学基金资助项目30300208,31000580
  • 【文献出处】 郑州大学学报(医学版) ,Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences) , 编辑部邮箱 ,2013年01期
  • 【分类号】Q943.2
  • 【被引频次】1
  • 【下载频次】216
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