人BNIP3基因真核表达载体的构建及其对HT-29细胞化疗敏感性的影响-中国学术期刊网络出版总库

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人BNIP3基因真核表达载体的构建及其对HT-29细胞化疗敏感性的影响

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【英文篇名】	Construction of human BNIP3 eukaryotic expression vector and its effect on chemosensitivity of HT-29 cells
【下载频次】	★★☆
【作者】	裴莉; 边志衡; 江恒; 陈克力; 陈建芳; 梁后杰;
【英文作者】	Pei Li1; Bian Zhiheng2; Jiang Heng2; Chen Keli2; Chen Jianfang2; Liang Houjie2(1Department of Hematology; 2Department of Oncology; Southwest Hospital; Third Military Medical University; Chongqing; 400038; China);
【作者单位】	第三军医大学西南医院血液科; 第三军医大学西南医院肿瘤科;
【文献出处】	第三军医大学学报 , Journal of Third Military Medical University, 编辑部邮箱 2013年 15期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	结肠肿瘤; HT-29细胞; BNIP3基因; 化疗; 凋亡; 表达载体;
【英文关键词】	colon neoplasm; HT-29 cell; BNIP3 gene; chemotherapy; apoptosis; expression vector;
【摘要】	目的构建人BNIP3真核表达载体,观察BNIP3高表达对人结肠癌细胞HT-29化疗敏感性的影响。方法PCR法扩增BNIP3基因,酶切后插入质粒pEGFP-C3,构建重组真核表达载体pEGFP-C3/BNIP3。脂质体转染人结肠癌细胞HT-29,Western blot检测BNIP3蛋白表达。MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-Fu)的化疗敏感性和细胞增殖,AnnexinV-APC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果酶切电泳分析和DNA序列测定证实,重组质粒pEGFP-C3/BNIP3构建成功;转染重组质粒的HT-29细胞BNIP3蛋白明显高表达。与未转染组和转染空质粒pEGFP-C3组比较,转染pEGFP-C3/BNIP3组5-Fu的IC50值显著降低[(120.11±5.45)、(113.40±4.72)μg/mL vs(19.08±2.62)μg/mL,P<0.05],细胞凋亡率显著增加[(5.51±0.32)%、(7.19±0.47)%vs(41.72±1.48)%,P<0.05],细胞克隆形成显著减少[(52±6)、(49±5)vs(11±3),P<0.05],细胞增殖速度减慢。结论成功构建了人BNIP3...
【英文摘要】	Objective To construct an eukaryotic expression vector encoding human Bcl-2 and adenovirus E1B 19 kDa interacting protein(BNIP3) gene,and to investigate the effect of BNIP3 over-expression on the chemosensitivity of human colon cancer cell line HT-29.Methods The full-length cDNA of BNIP3 was amplified by PCR and cloned into pEGFP-C3 vector using genetic engineering technology.The recombinant expression vector pEGFP-C3 / BNIP3 was confirmed by enzyme digestion and sequencing,and then was transferred into HT-...
【基金】	重庆市自然科学基金重点项目(CSTC2007BA5008)~~
【更新日期】	2013-09-29
【分类号】	R735.35
【正文快照】	Supported by the Key Project of Natural Science Foundation of Chongqing(CSTC2007BA5008).Corresponding author:Liang Houjie,E-mail:Lianghoujie@sina.com结肠癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤。化疗是进展期结肠癌最基本的治疗手段,但是肿瘤细胞对化疗的耐药严重影响了?

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