中国学术期刊网络出版总库
  关闭
食品级木聚糖酶黑曲霉工程菌的构建  
   推荐 CAJ下载 PDF下载
【英文篇名】 Construction of food-grade xylanase engineering strain of Aspergillus niger
【下载频次】 ★★★★★
【作者】 李杰; 张会; 张莹莹; 双宝; 王多佳; 赵宁; 李勇; 赫福霞;
【英文作者】 LI Jie; ZHANG Hui; ZHANG Yingying; SHUANG Bao; WANG Duojia; ZHAO Ning; LI Yong; HE Fuxia; School of Life Science; Northeast Agricultural University;
【作者单位】 东北农业大学生命科学学院;
【文献出处】 东北农业大学学报 , Journal of Northeast Agricultural University, 编辑部邮箱 2013年 11期  
期刊荣誉:中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 木聚糖酶; 黑曲霉; 同源重组; 根癌农杆菌;
【英文关键词】 xylanase; Aspergillus niger; homologous recombination; Agrobaoterium tumefaciens;
【摘要】 从黑曲霉CICC2462中扩增得到木聚糖酶基因xynB的成熟肽编码序列(746 bp),并针对黑曲霉CICC2462中高表达的糖化酶基因位点,通过重叠延伸PCR将xynB基因片段与糖化酶基因的5'同源臂、3'同源臂进行拼接得到同源重组表达框GBG,将其定向插入表达载体pSZH-CYM中,构建黑曲霉表达载体pSZH-xynB。将载体pSZH-xynB通过冻融法转化农杆菌AGL1,通过农杆菌介导法转化黑曲霉CICC2462菌丝体。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得47株重组菌株,并从其中12株中筛选出在糖化酶基因位点发生基因置换的同源重组菌株9株。而后通过连续传代、筛选和PCR检测,获得消除潮霉素基因的纯合的同源重组菌株,获得符合食品级生产要求的工程菌。对工程菌进行发酵培养、酶活性检测和SDS-PAGE分析,表明在糖化酶摇瓶发酵条件下,工程菌培养液上清的木聚糖酶活性高达4 495.8975 U·mL-1。研究结果为生产低木糖苷酶活性的内切木聚糖酶提供新途径,为利用黑曲霉表达系统安全高效地生产其他酶制剂和重组蛋白提供参考。
【英文摘要】 The mature peptide coding sequence of xylanase gene xynB(746 bp)was amplified from the Aspergillus niger CICC2462,for high expression of glucoamylase gene locus in Aspergillus niger CICC2462, Splicing xynB gene fragment, glucoamylase gene 5 'homology arm and 3' homologous arm for homologous recombination expression cassette GBG by overlap extension PCR,The whole gene was inserted into expressional vector pSZH-CYM form the Aspergillus niger expressional vector pSZH-xynB, Using freeze thawing method pSZH-xynB...
【基金】 山东大学微生物技术国家重点实验室开放项目(M2008-17)
【更新日期】 2014-03-26
【分类号】 Q78
【正文快照】 木聚糖酶(D-xylanxylanohydrolaseEC3.2.1.8)是一类木聚糖降解酶系,属于水解酶类。木聚糖的彻底降解需要多种酶的协同作用,其中以β-1,4-内切木聚糖酶最为关键,它以内切的方式作用于木聚糖主链,产生不同长度的木寡糖和少量木糖,可广泛应用于造纸[1-5]、食品[6-9]、饲料工业[10]

xxx
【读者推荐文章】中国期刊全文数据库 中国博士学位论文全文数据库 中国优秀硕士学位论文全文数据库
【相似文献】
中国期刊全文数据库
中国优秀硕士学位论文全文数据库
中国博士学位论文全文数据库
中国重要会议论文全文数据库
中国重要报纸全文数据库
中国学术期刊网络出版总库
点击下列相关研究机构和相关文献作者,可以直接查到这些机构和作者被《中国知识资源总库》收录的其它文献,使您全面了解该机构和该作者的研究动态和历史。
【文献分类导航】从导航的最底层可以看到与本文研究领域相同的文献,从上层导航可以浏览更多相关领域的文献。

生物科学
  分子生物学
   基因工程(遗传工程)
  
 
  CNKI系列数据库编辑出版及版权所有:中国学术期刊(光盘版)电子杂志社
中国知网技术服务及网站系统软件版权所有:清华同方知网(北京)技术有限公司
其它数据库版权所有:各数据库编辑出版单位(见各库版权信息)
京ICP证040431号    互联网出版许可证 新出网证(京)字008号