H5亚型禽流感病毒现场实时荧光RT-LAMP检测方法点的建立与优化-中国学术期刊网络出版总库

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H5亚型禽流感病毒现场实时荧光RT-LAMP检测方法点的建立与优化

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【英文篇名】	Establish and Optimization of Real-Time Fluorescent Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification for Detection of Avian Influenza H5 Hemagglutinin Gene
【下载频次】	★★★★★
【作者】	刘芸; 唐金明; 陶虹; 孙洁; 卢体康; 廖立珊; 刘建利; 曾少灵; 曹琛福; 张彩虹; 阮周曦; 吕建强; 杨俊兴; 花群义; 陈正礼; 秦智锋;
【英文作者】	LIU Yun; TANG Jin-ming; TAO Hong; SUN Jie; LU Ti-kang; LIAO Li-shan; LIU Jian-li; ZENG Shao-ling; CAO Chen-fu; ZHANG Cai-hong; RUAN Zhou-xi; LV Jian-qiang; YANG Jun-xing; HUA Qun-yi; CHEN Zheng-li; QIN Zhi-feng; Sichuan Agricultural University; Shenzhen Entry-Exit Inspection & Quarantine Bureau; Shenzhen Inspection and Quarantine Science Research Institute; Shenzhen Key Laboratory of Inspection Research & Development of Alien Pests;
【作者单位】	四川农业大学动物医学院; 深圳出入境检验检疫局; 深圳市检验检疫科学研究院; 深圳市外来有害生物质检测技术研发重点试验室;
【文献出处】	病毒学报 , Chinese Journal of Virology, 编辑部邮箱 2013年 05期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	H5亚型禽流感; 实时荧光反转录环介导等温扩增; 现场检测;
【英文关键词】	H5 subtype avian influenza; real-time fluorescent reverse transcription loop-mediated; Detection on the spot;
【摘要】	H5亚型禽流感是重要的人兽共患病,建立现场快速分子学检测方法是其防控关键。本实验首次借助热裂解法抽提病毒RNA,建立H5亚型禽流感病毒(H5subtype avian influenza Virus,AIV-H5)实时荧光反转录环介导等温扩增(Fluorescent quantitative real-time reversetranscription-LAMP,qRT-LAMP)检测法,并对该法进行特异性、敏感性、可重复性及可靠性分析;同时对比钙黄绿素(Calcein)、SYBR Green I、羟基萘酚蓝(Hydroxynaphthol blue,HNB)、SYTO 81四种荧光染色剂在颜色判定中的工作情况,筛选最佳染料。试验结果显示本实验所建AIV-H5qRT-LAMP法可有效鉴别AIV-H5,其敏感性较国家标准实时荧光RT-PCR检测法高100倍,最低检测限可达1个基因拷贝;该法与IBV、NDV等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应,特异性强;同时该法具有良好重复性。本实验筛选出最佳染色剂Calcein。小规模田间试验显示该法用于AIV-H5的普查监测结果可靠。可见本实验建立AIV-H5qRT-LAMP检...
【英文摘要】	H5 subtype avian influenza(AIV-H5 )is a major causative agent of animalloimia a rapid and sensitive molecular biological diagnosis is crucial to the control program of AIV-H5 .AIV-H5 real-time fluorescent reverse transcription loop-mediated isothermal amplification(qRT-LAMP)was established by means of heat treatment of the samples.The sensitivity,specificity and repeatability of this method were assessed and the performance of Calcein,SYBR Green I,HNB,SYTO 81 in colorimetric detection was comparatively anal...
【基金】	科技部质检公益项目(201210018-4); 深圳市基础研究重点项目(JC201105190875A)资助
【更新日期】	2013-12-19
【分类号】	S852.65
【正文快照】	禽流感是由A型流感病毒不同亚型引起的一类主要感染禽类的烈性传染病,分为非致病性、低致病性和高致病性三类[1]。其中高致病性禽流感可由H5亚型(以H5N1为代表)禽流感病毒引起,鸟禽和人类感染后表现不同程度的呼吸道症状甚至死亡,得到世界卫生组织和粮农组织的高度关注。鉴于禽

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