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湘油15 PGIP9蛋白基因的克隆和蛋白序列结构分析及原核表达  
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【英文篇名】 Cloning,Sequence and Structure Analysis of Polygalacturonase Inhibiting Protein Gene(PGIP 9) of Brassica napus Xiangyou 15 and Prokaryotic Expression
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【作者】 刘睿洋; 皇甫海燕; 靳芙蓉; 官春云;
【英文作者】 LIU Rui-yang1; HUANGFU Hai-yan2; JIN Fu-rong2; GUAN Chun-yun2(1 Oilseed Crops Institute; Hunan Agricultural University; Changsha; Hunan 410128; China; 2 National Center of Oil Seed Crops Improvement; Hunan Branch; China);
【作者单位】 湖南农业大学油料作物研究所; 国家油料作物改良中心湖南分中心;
【文献出处】 作物研究 , Crop Research, 编辑部邮箱 2012年 02期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 甘蓝型油菜; 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白; 原核表达; 序列分析; 结构预测;
【英文关键词】 Brassica napus; PGIP9; Prokaryotic expression; Sequence analysis; Structure prediction;
【摘要】 运用生物信息学软件对湘油15 PGIP9基因的核苷酸、蛋白氨基酸序列进行分析,并对其蛋白结构进行预测。结果表明:湘油15 PGIP9编码区CDS长1 011 bp,编码336个氨基酸的开放阅读框,分子量为37.5kDa,等电点为7.9。N端1～22个氨基酸是信号肽,且这一区域疏水性较强,具有5个潜在的N-糖基化位点。N端和C端还各具有4个参与二硫键形成的半胱氨酸残基。二级结构显示有11个α-螺旋,14个β-延伸和25个无规则卷曲。中心LRR结构域由6个串联的LRR基序组成。随后将PGIP9的CDS序列亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建pET-32a-PGIP9重组表达质粒,并转化E.coil BL21(DE3),25℃,终浓度为0.2 mmol/L和0.5 mmol/L的IPTG诱导2 h,都成功的表达了融合蛋白pET-32a-PGIP9,其分子量约为52kDa,发现主要以包涵体形式存在,没有可溶形式的蛋白表达。
【英文摘要】 Ribonucleotide and amino acid sequence of Xiangyou 15 PGIP were analyzed,the protein structure were predicted by biological information software.CDS of Xiangyou 15 PGIP 9 code area was 1 011 bp,which encoded 336 amino acid of open reading frame with a molecular mass of 37.5 kDa and isoelectric point of 7.9.1~22 amino acids were predicted to the N-terminal signal peptide with stronger hydrophobic region.The deduced amino acids sequence contained 5 potential N-glycosylation sites and 4 cysteine residues on N-...
【基金】 国家“863”基金项目(2006AA10A112); 农业部“948”基金项目(2011-G23)
【更新日期】 2012-05-28
【分类号】 S565.4
【正文快照】 油菜菌核病严重的影响到了油菜的产量和品质[1],而内切多聚半乳糖醛酸酶(edo-polygalac-turonases,PGs)是植物致病的主要因素[2,3]。相关研究[4,5]表明,植物体内会产生一种特异性的热稳定糖蛋白———多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polyga-lacturonase-inhibiting proteins,PGIPs)?

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