以百合DNA为材料,对影响其RAPD反应体系中的6个主要因素(模板DNA、Mg2+、TaqDNA聚合酶、引物、dNTPs、退火温度)进行优化,最终确定了百合RAPD反应的最佳体系(25μL)为:40 ng模板DNA,1.5 mmol/L Mg2+,1.0 U TaqDNA聚合酶,1.0μmol/L引物,200μmol/L dNTPs,引物E 13的最适退火温度为37.3℃。该体系的建立为今后应用RAPD技术鉴定百合属植物的种质资源和遗传多样性研究奠定了基础。
【英文摘要】
The optimum RAPD reaction system for Lilium was established using RAPD amplification with six factors(DNA template,Mg2+,TaqDNA polymerase,primer,dNTPs and annealing temperature).The optimum RAPD reaction system(25 μL) contains 40 ng DNA template,1.5 mmol/L Mg2+,1.0 U TaqDNA polymerase,1.0 μmol/L RAPD primer and 200 μmol/L dNTPs.The suitable annealing temperature of primer E 13 was 37.3 ℃.The research laid the foundation for RAPD analysis on studies of germplasm resources identification and genetic diversity...
【基金】
国家自然科学基金(编号:30860161);
云南省教育厅科学研究基金(编号:2011 Y 212)