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鸭坦布苏病毒E蛋白中和性单克隆杭体的制备

Development of Neutralizing Monoclonal Antibody Against Protein E of Duck Tembusu Virus

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【Author】 JI Xiwen1,2,LI Xuesong2,LI Guoxin2,XIAO Yali2,YAN Pixi2,XU Dawei2,FAN Zhao2,ZHANG Qijin1,LI Zejun2,3(1.College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot,Inner Mongolia 010018;2.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241;3.National Poultry Engineering and Technology Research Center,Shanghai 200241)

【机构】内蒙古农业大学兽医学院；中国农业科学院上海兽医研究所农业部寄生虫重点开放实验室；国家家禽工程技术研究中心；

【摘要】本试验利用纯化的鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus , DTMUV)奉贤株(FX2010)免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,筛选获得3株能够稳定分泌杭DTMUV的杂交瘤细胞,分别命名为:J1-E5-E4, 7B5和1E5-B6,3株杂交瘤细胞诱导同品系刁、鼠的杭体效价为1:12 800,1:6 400和1:25 600。间接ELISA和IFA结果显示,3株单杭均可以与DTMUV发生特异性反应。进一步研究发现,J1-E5-E4可以与DTMUV-E蛋白结合,使得表达E蛋白的293T细胞显现出特异性的绿色荧光;在病毒中和试验中,J1-E5-E4可以中和DTMUV,使其失去致死鸡胚的能力。这些结果表明,J1-E5-E4是一株针对DTMUV-E蛋白中和表位的单杭,该单杭将在DTMUV诊断和杭原分析中发挥重要作用。更多还原

【Abstract】 BALB/c mice were immunized with the purified Fengxian strain(FX2010) of duck Tembusu virus(DTMUV).Three monoclonal antibodies(McAb) designated J1-E5-E4,7B5 and 1E5-B6 were obtained by lymphocyte hybridoma technique.The ascites titers of J1-E5-E4,7B5 and 1E5-B6 were 1:12 800,1:6 400 and 1:25 600,respectively.All three McAbs were able to react with DTMUV specifically by indirect ELISA and indirect immunofluorescence assay(IFA).Importantly,J1-E5-E4 was found to bind to protein E of DTMUV specifically in cells and neutralize DTMUV in chicken embryos.The McAb would be useful in clinical diagnosis and antigen analysis of DTMUV.更多还原

【关键词】 DTMUV； E蛋白；中和；单克隆抗体；
【Key words】 DTMUV； protein E； neutralization； monocolnal antibody；

【基金】国家自然科学基金面上项目(31172332);公益性行业(农业)科研专项经费项目(201003012);863计划(2011AA10A200);国际合作项目(S2011ZR0429)

【文献出处】中国家禽 ,China Poultry , 编辑部邮箱 ,2012年04期

【分类号】S858.32
【被引频次】22
【下载频次】352

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