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牛传染性鼻气管炎病毒gB蛋白单克隆抗体的制备及初步应用  
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【英文篇名】 Preparation and preliminary application of monoclonal antibody against gB protein of bovine rhinotracheitis virus
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【作者】 王蓓蕾; 孟日增; 王为; 钱爱东;
【英文作者】 WANG Bei-lei*; MENG Ri-zeng; WANG Wei; QIAN Ai-dong(*College Animal Science & Technology; Jilin Agriculture University; Changchun 130118; China);
【作者单位】 吉林农业大学动物科技学院; 长春生物制品研究所有限责任公司实验动物室; 吉林出入境检验检疫局;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2012年 02期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 疱疹病毒Ⅰ型; gB蛋白; 抗体; 单克隆; 酶联免疫吸附测定;
【英文关键词】 Herpes virus type Ⅰ; gB protein; Antibody; monoclonal; Enzyme-linked immunosorbent assay;
【摘要】 目的制备牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gB蛋白单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA方法。方法应用重组IBRV gB蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,利用IBRV全病毒免疫家兔制备多克隆抗体,采用方阵滴定法确定兔抗IBRV IgG多抗与单抗的最适工作浓度,建立双抗体夹心ELISA检测方法,并对该方法进行灵敏度和特异性验证。结果获得了1株稳定分泌抗IBRV gB单抗的杂交瘤细胞株,命名为2C4;兔抗IBRVIgG多抗和单抗的最适工作浓度分别为2.620 9和2.634 1μg∕ml,酶标二抗的最适稀释度为1∶30 000;应用建立的双抗体夹心ELISA法对100份IBRV阳性血清样品进行检测,结果均呈阳性,符合率为100%;检测牛口蹄疫病毒、牛流行热病毒、牛副流感3型病毒的结果均呈阴性。结论成功制备了IBRV gB蛋白单克隆抗体,并建立了IBRV双抗体夹心ELISA检测方法,可用于牛传染性鼻气管炎的诊断和流行病学调查。
【英文摘要】 Objective To prepare the monoclonal antibody against gB protein of infections bovine rhinotracheitis virus(IBRV) and develop a double antibody sandwich ELISA method.Methods BALB/c mice were immunized with recombinant IBRV gB protein to prepare monoclonal antibody by hybridoma technique,and rabbits were immunized with whole IBRV to prepare polyclonal antibody.The working concentrations of prepared monoclonal and polyclonal antibodies were optimized by block titration,based on which a double antibody sandwich...
【更新日期】 2012-02-28
【分类号】 S858.23
【正文快照】 牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotra-cheitis virus,IBRV)可侵害牛的多种组织和器官并表现不同的临床型,如呼吸道型、生殖道型、脑膜炎型等[1-2]。当病毒侵入动物体内后可潜伏于一定部位,在机体抵抗力较弱时,又能向外排毒[3],对养牛业造成很大威胁[4-5]。gB蛋白?

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