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p16基因真核表达质粒的构建及其在骨肉瘤细胞中的表达  
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【英文篇名】 Construction of eukaryotic expression vector for p16 gene and its expression in osteosarcoma cells
【下载频次】 ★★
【作者】 夏羿凡; 余娴; 张健;
【英文作者】 XIA Yi-fan*; YU Xian; ZHANG Jian(*Department of Orthopaedics; The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University; Chongqing 400016; China);
【作者单位】 重庆医科大学附属第一医院骨科; 川北医学院附属医院骨科; 川北医学院药物研究所;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2012年 02期  
期刊荣誉：中文核心期刊要目总览  ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 基因; p16; 真核细胞; 基因表达; 骨肉瘤;
【英文关键词】 Gene; p16; Eukaryotic cells; Gene expression; Osteosarcoma;
【摘要】 目的构建p16基因真核表达质粒,并鉴定其在骨肉瘤U-2OS细胞中的表达。方法提取HeLa细胞总RNA,扩增p16基因,克隆至真核表达质粒pcDNA3-HA中,构建重组表达质粒pcDNA3-HA-p16,转染U-2OS细胞,免疫荧光及Westernblot法鉴定p16/HA的表达。结果重组表达质粒pcDNA3-HA-p16经双酶切及测序证实构建正确;p16/HA在U-2OS细胞中成功表达,且主要分布于细胞核。结论成功构建了p16基因真核表达质粒,并在U-2OS细胞中成功表达。
【英文摘要】 Objective To construct a eukaryotic expression vector for p16 gene and determine its expression in osteosarcoma U-2OS cells.Methods Total RNA of HeLa cells was extracted,with which p16 gene was amplified and cloned into eukaryotic expression vector pcDNA3-HA.The constructed recombinant plasmid pcDNA3-HA-p16 was transfected to U-2OS cells,and the expression of p16/HA was identified by IFA and Western blot.Results Restriction analysis and sequencing proved that recombinant plasmid pcDNA3-HA-p16 was constructe...
【更新日期】 2012-02-28
【分类号】 R738
【正文快照】 p16基因定位于人染色体9p21,是人类发现的第1个直接参与细胞周期调节的抑癌基因[1],又称为多肿瘤抑制基因1或INK4a,其编码的p16蛋白含156个氨基酸。研究发现,在肝癌[2]、胃癌[3]、软骨肉瘤[4]、肺癌[5]等肿瘤模型中导入p16基因均可产生一定的抗肿瘤效应,表明p16可能成为肿瘤基?

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