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MR-1S融合蛋白的表达、纯化与保存及其抗血清的制备  
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【英文篇名】 Expression,purification and preservation of myofibrillogenesis regulator 1S recombinant protein and its antiserum preparation
【下载频次】 ★★★★☆
【作者】 卢仁泉; 张菁; 高翔; 郭林;
【英文作者】 LU Renquan; ZHANG Jing; GAO Xiang; GUO Lin.(Department of Oncology; Shanghai Medical College; Fudan University; Department of Clinical Laboratory; Shanghai Cancer Center; Shanghai 200032; China);
【作者单位】 复旦大学上海医学院肿瘤学系; 复旦大学附属肿瘤医院检验科;
【文献出处】 检验医学 , Laboratory Medicine, 编辑部邮箱 2012年 10期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 肌纤维生成调节因子1; 分子克隆; 抗体;
【英文关键词】 Myofibrillogenesis regulator 1; Molecular cloning; Antibody;
【摘要】 目的通过人肌纤生成调节因子1(hMR-1S)基因重组表达获得MR-1S-His融合蛋白,纯化后制备抗MR-1S抗血清;同时确定该蛋白保存的稳定体系,为研究MR-1S蛋白理化性质及其功能提供关键的原料。方法利用原核表达载体pET21a(+),构建pET21a-MR-1S重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导MR-1S-His融合蛋白表达,亲和纯化后Western blot鉴定;进一步用该融合蛋白免疫新西兰兔,制备抗MR-1S的多克隆抗体。同时通过在不同温度条件下,对4种不同的稳定体系中保存后蛋白活性测定进行比较,确定最合适的稳定保存体系及条件。结果构建了重组质粒pET21a-MR-1S,并在BL21中进行可溶性表达,经Western blot鉴定确认;免疫新西兰兔获得了抗MR-1S抗血清;确定了合适的稳定体系及保存条件。结论在非变性条件下实现了可溶性MR-1S融合蛋白的表达和稳定保存,进一步制备的抗MR-1S抗血清为研究MR-1S的性质及功能奠定了基础。
【英文摘要】 Objective To obtain the myofibrillogenesis regulator 1S(MR-1S)-His recombinant protein through the expression of MR-1S gene and prepare anti-MR-1S antiserum after purification.To identify the stable system to preserve the recombinant protein,and to provid the reference for the investigation of MR-1S protein characteristics and biological function.Methods The recombinant plasmid pET21a-MR-1S was constructed with pronucleus expression vector pET 21a(+) and transferred into Escherichia coli BL21(DE3),and the e...
【更新日期】 2012-12-07
【分类号】 Q78
【正文快照】 人肌纤生成调节因子-1(human myofibrillogen-esis regulator 1,hMR-1)是近年从人骨骼肌cDNA文库中克隆得到的一个人类新功能基因,GenBank收录号为AF417001[1]。该基因定位于2q35,编码一个142个氨基酸组成的蛋白质,因其在3种转录剪切异构体中长度最短,故也称为MR-1S[2]。MR-1S?

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