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沙棘SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

Optimization of the SRAP-PCR System for Sea Buckthorn(Hippophae rhamnoides) and Primers Screening

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【作者】 赵春娥鲍荟宇李贺

【Author】 ZHAO Chun-e1,2,BAO Hui-yu2,LI He2 (1.College of Life Science,Liaoning Normal University,Dalian 116029,Liaoning,China; 2.College of Environment and Resources,Dalian Nationalities University,Dalian 116600,Liaoning,China)

【机构】 辽宁师范大学生命科学学院大连民族学院环境与资源学院

【摘要】 为建立适合沙棘(Hippophae rhamnoides L.)的SRAP-PCR反应体系,对影响SRAP-PCR的Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、模板DNA浓度进行了优化。优化后的反应体系为Mg2+3.0 mmol/L、Taq DNA聚合酶2U/25μL、引物0.8μmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、模板DNA 30 ng/25μL,反应总体系25μL。利用此体系从30对引物组合中筛选出17对适合沙棘SRAP-PCR的引物,有助于沙棘的分子标记辅助育种研究。

【Abstract】 The concentrations of Mg2+,Taq DNA polymerase,primers,dNTPs,template DNA affecting the SRAP-PCR reaction were optimized to establish the SRAP-PCR system for sea buckthorn(Hippophae rhamnoides L.).The optimum 25 μL reaction system contained 3.0 mmol/L Mg2+,2 U/25 μL Taq DNA polymerase,0.8 μmol/L primers,0.25 mmol/L dNTPs and 30 ng/25 μL DNA templates.17 out of 30 primer pair combinations were screened out using the optimized amplification system,which would support the molecular marker assisted breeding of sea buckthorn.

【基金】 国家自然科学基金项目(31100489)
  • 【文献出处】 湖北农业科学 ,Hubei Agricultural Sciences , 编辑部邮箱 ,2012年08期
  • 【分类号】S793.6
  • 【被引频次】8
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