EGFRvⅢ特异性单链抗体的制备及其靶向性能-中国学术期刊网络出版总库

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EGFRvⅢ特异性单链抗体的制备及其靶向性能

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【英文篇名】	Preparation of EGFRvⅢ specific single-chain Fv and its targeting activity
【下载频次】	★★★★★
【作者】	张庆丽; 石必枝; 蒋华; 周敏; 王海; 孔娟; 谢海龙;
【英文作者】	ZHANG Qing-li1; 2; SHI Bi-zhi2; JIANG Hua2; ZHOU Min2; WANG Hai2; KONG Juan2; XIE Hai-long1 (1. Cancer Research Institute; University of South China; Hengyang 421001; Hunan; China; 2. State Key Laboratory of Oncogenes and Related Genes; Shanghai Cancer Institute; Medical School of Shanghai Jiaotong University; Shanghai 200032; China);
【作者单位】	南华大学肿瘤研究所; 上海交通大学医学院上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室;
【文献出处】	中国肿瘤生物治疗杂志 , Chinese Journal of Cancer Biotherapy, 编辑部邮箱 2011年 01期期刊荣誉：中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊
【中文关键词】	EGFRvⅢ; scFv; 脑胶质瘤; 肝癌; 移植瘤; 靶向治疗; 活体成像;
【英文关键词】	EGFRvⅢ; scFv; glioma; hepatoma; implanted tumor; targeted therapy; in vivo imaging;
【摘要】	目的:应用噬菌体展示技术筛选出能与EGFRvⅢ特异性结合的单链抗体(single-chain Fv,scFv),并研究其靶向性能。方法:构建EGFRvⅢ特异性scFv噬菌体库,ELISA筛选阳性克隆,阳性EGFRvⅢ-scFv质粒重新克隆入pCANTAB-Throm-bin-His载体,转化E.coli HB2151,IPTG诱导可溶性EGFRvⅢ-scFv表达。间接免疫荧光及裸鼠活体成像技术鉴定EGFRvⅢ-scFv与EGFRvⅢ的特异性结合。结果:成功构建了EGFRvⅢ-scFv噬菌体库,ELISA筛选得到16个EGFRvⅢ-scFv克隆,取一克隆命名为EGFRvⅢ-scFv-2A1。EGFRvⅢ-scFv-2A1质粒重新克隆入pCANTAB-Thrombin-His载体,成功表达可溶性EGFRvⅢ-scFv-2A1。EGFRvⅢ-scFv-2A1在体外可特异性结合HuH7-EGFRvⅢ肝癌细胞,但不结合HuH7-EGFR和HuH7肝癌细胞;荧光标记的EGFRvⅢ-scFv-2A1裸鼠体内可特异性结合U87MG-EGFRvⅢ胶质瘤细胞移植瘤,而不结合U87MG细胞移植瘤。结论:成功制备的EGFRvⅢ-sc...
【英文摘要】	Objective:To screen for EGFRvⅢ specific single-chain Fv (scFv) by phage display library and to examine its targeting activity. Methods:EGFRvⅢ specific scFv phage library was constructed,and the positive EGFRvⅢ-scFv clone was screened by ELISA. After cloned into pCANTAB-Thrombin-His vector,EGFRvⅢ-scFv plasmid was transformed into E.coli HB2151,and soluble EGFRvⅢ-scFv was induced by IPTG. The specific binding activity of EGFRvⅢ-scFv with EGFRvⅢ was studied by indirect immunofluorescence and in vivo imaging. R...
【基金】	卫生部“重大新药创制”科技重大专项资助项目( No. 2009ZX09103-701)~~
【更新日期】	2011-03-08
【分类号】	R392.1
【正文快照】	专家点评随着生物技术的不断发展和完善,单克隆抗体对靶分子的特异性识别及其所介导的生物学效应大大提高了疾病临床诊断的准确率和治疗效果,作为生物药物的单克隆抗体已成为生物医药发展的主要趋势之一。通过噬菌体库技术研制成功的TNF-α全人抗体(adalimumab)自2002年被美国F

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