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家蚕G蛋白γ亚基BmGγ30A的克隆及其原核表达
【摘要】 异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导。为了研究G蛋白在家蚕中的生理功能及其作用机理,运用生物信息学方法预测到家蚕Gγ的一段序列,通过设计特异性引物、PCR和RACE技术,克隆得到家蚕Gγ30A的序列。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+),并导入E.coli BI21宿主菌中进行诱导表达。家蚕Gγ30A重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子量约38 KDa处,出现特异性蛋白条带,表达方式分析发现融合蛋白在上清和包涵体中均有表达;试验结果说明我们已成功克隆到家蚕Gγ30A基因(GeneBank登录号:HQ699664),并在E.coli BL21中高效表达。
【基金】 安徽省农业科学院院长青年创新基金项目(编号201005A01);现代农业产业技术体系建设专项(蚕桑);安徽省蚕桑产业技术体系
- 【文献出处】 中国蚕业 ,China Sericulture , 编辑部邮箱 ,2011年01期
- 【分类号】S881.24
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