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角蛋白启动子荧光素酶表达载体的构建及其表达活性分析

Construction and Activity Analysis of K14/K5 Promoter Vector Containing Luciferase Gene

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【作者】 代蓉孟庆勇沈思军石国庆刘守仁

【Author】 DAI Rong1,2,MENG Qingyong3,SHEN Sijun1,SHI Guoqing1,2 and LIU Shouren1,2(1.Shihezi University,Shihezi Xinjiang 832000,China;2.Xinjiang Agricultural Reclamation Academy,Shihezi Xinjiang832000,China;3.China Agricultural University,Beijing 100193,China)

【机构】 石河子大学动物科技学院新疆农垦科学院中国农业大学生命科学院

【摘要】 角蛋白14(K14)和角蛋白5(K5)主要在毛囊基质和复层鳞状上皮基底层的角质细胞里表达。这两个启动子已被广泛应用于毛囊特异表达外源基因的转基因小鼠模型的研究中,为了能将其应用于转基因绵羊生产,探讨基因对绵羊毛囊发育的影响,从人基因组中克隆得到K14和K5启动子,利用不同的报告基因在细胞水平分析各启动子的表达活性。结果表明,这两个启动子在不同细胞系中都能驱动外源基因的表达,而且K14启动子在小鼠皮肤细胞系JB6-C41中的表达活性高于其他细胞。

【Abstract】 Human keratin K14 and K5 are produced in stratified epithelia.This tissue-specific expression is directed by the two promoters which have been used extensively to drive the expression of transgenes to the skin and hair follicle.In this paper,the pGL3-K14 and pGL3-K5 promoter vectors were constructed by insert the K14 and K5 promoter into the MCS of pGL3-Basic,respectively.The promoters activity was analyzed by two luciferase reporter assay and GFP expression test.These results showed that two promoters were both expressed in all cell lines.The activity of K14 promoter was higher in skin cell line than in others cell lines.

【关键词】 启动子活性荧光素酶角蛋白
【Key words】 Activity of promoterLuciferaseKeratin
【基金】 转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008-001B);国家自然科学基金(31001002)
  • 【文献出处】 西北农业学报 ,Acta Agriculturae Boreali-Occidentalis Sinica , 编辑部邮箱 ,2011年08期
  • 【分类号】Q78
  • 【被引频次】5
  • 【下载频次】258
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