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siRNA沉默AFP基因对肝癌细胞系EGHC-9901凋亡的影响  
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【英文篇名】 Effects of AFP gene silenced by siRNA on apoptosis of hepatocellular carcinoma cell line EGHC-9901
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【作者】 张玲; 贺涛; 崔宏; 王云检; 黄长山; 黄涛; 韩风;
【英文作者】 ZHANG Ling; HE Tao; CUI Hong; WANG Yunjian; HUANG Changshan; HUANG Tao; HAN Feng Department of Hepatopancreatobiliary Surgery; Henan Tumor Hospital; Zhengzhou 450008; China;
【作者单位】 河南省肿瘤医院肝胆胰外科;
【文献出处】 胃肠病学和肝病学杂志 , Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology, 编辑部邮箱 2011年 01期  
期刊荣誉:ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 甲胎蛋白; 原发性肝癌; 凋亡;
【英文关键词】 Alpha fetoprotein; Hepatocellular carcinoma(HCC); Apoptosis;
【摘要】 目的建立稳定表达针对AFP基因siRNA质粒的肝癌细胞模型并探讨对其凋亡的影响。方法构建针对AFP基因的siRNAs表达质粒,脂质体法将该质粒转染肝癌细胞系EGHC-9901,G418筛选4~5周后Western blot及RT-PCR检测靶基因抑制效果,细胞分组:实验组(siRNA-afp),转染AFP-siRNA质粒组;载体对照组,转染空载体组;空白对照组,未做任何处理组。免疫荧光检测细胞在无血清状态下凋亡情况,Western blot及RT-PCR检测Caspase-3、Caspase-8等凋亡相关蛋白表达。结果在体外成功构建针对AFP的siRNA表达质粒并在体外建立稳定表达该质粒肝癌细胞系EGHC-9901,转染后细胞表达AFP近乎完全抑制;免疫荧光表明促进细胞在无血清状态下的实验组凋亡率为32%±4%,对照组凋亡率为17%±3%,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR及Western blot检测凋亡相关蛋白表明实验组Caspase-3表达较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),而Caspase-8、Caspase-9、bcl-2表达无显著差异(P>0.05)。结论在体外成功建立稳定表...
【英文摘要】 Objective To observe effects of AFP gene silenced by siRNA on apoptosis of hepatocellular carcinoma cell line EGHC-9901. Methods siRNA expressing plasmid aimed at AFP gene was firstly established and subsequently transfected into hepatocellular carcinoma cell line EGHC-9901 which had the high expression of AFP;after G418 positive clone selection for 4~5 weeks,expression of AFP mRNA and protein were respectively detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blot.Then cells were divided into three groups: ...
【基金】 河南省基础与前沿研究项目(NO.082300450110)
【更新日期】 2011-02-25
【分类号】 R735.7
【正文快照】 原发性肝癌(HCC)是我国常见恶性肿瘤之一,死亡率在消化系统中列第三位,其特异性抗体至今仍不明确,70%的PHC患者血中高表达甲胎蛋白(alpha fe-toprotein,AFP),AFP目前已被公认为一种能帮助诊断和判断预后的重要肿瘤标志物。近几年的研究表明AFP可产生多重效应,影响细胞的分化、?

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