RNA干扰沉默CTGF对牛角膜内皮细胞增殖的影响

【摘要】 目的:探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默结缔组织生长因子(connective tissuegrowth factor,CTGF)表达对牛角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)增殖的影响。方法:设计并合成CTGF特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),用脂质体转染入培养的牛CECs,反转录聚合酶链反应(reversetransfection-polymerase chain reaction,RT-PCR)法观察基因沉默效果,1μg/L TGF-β2作用于转染前、后的牛CECs,CCK-8检测法观察RNA干扰对牛CECs增殖的影响。结果:CTGF siRNA成功转染入培养的牛角膜内皮细胞并有效沉默CTGF mRNA表达,转染24,48h和72h CTGF mRNA表达分别为正常对照组的17.3%,24.4%和41.7%,与正常对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。在转染24、48h时1μg/L TGF-β2对牛CECs的抑制率分别为0.3804±0.0026、0.3117±0.0075。与对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CTGF特异性siRNA能有效沉默细胞内CTGF mRNA表达,促进牛CECs的增殖。更多还原