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幽门螺杆菌NCTC11637株Hp1501蛋白的原核表达与纯化  
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【英文篇名】 Prokaryotic Expression and Purification of Hp1501 Protein of Helicobacter pylori NCTC11637 Strain
【下载频次】 ★★
【作者】 杨继文; 杨致邦; 敬保迁; 于拽拽; 熊玉霞; 王朝丽; 冯莉;
【英文作者】 YANG Ji-wen; YANG Zhi-bang; JING Bao-qian; YU Zhuai-zhuai; XIONG Yu-xia; WANG Chao-li; FENG Li(Institute of Neuroscience; Laboratory of Pathogen Biology and Immunology Experimental Teaching Center of Basic Medicine; Chongqing Medical University; Chongqing 400016; China);
【作者单位】 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室神经科学研究中心; 川北医学院分子生物学研究所;
【文献出处】 中国生物制品学杂志 , Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2011年 12期  
期刊荣誉：ASPT来源刊  CJFD收录刊
【中文关键词】 幽门螺杆菌; Hp1501基因; 生物信息学; 原核细胞; 基因表达; 纯化;
【英文关键词】 Helicobacter pylori; Hp1501 gene; Bioinformatics; Prokaryotic cells; Gene expression; Purification;
【摘要】 目的原核表达并纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC11637株Hp1501蛋白。方法 PCR扩增H.pylori NCTC11637株Hp1501基因编码功能区序列Hp1501a,定向克隆至pQE30载体,构建重组原核表达质粒pQE30-Hp1501a,转化E.coli XL1-blue,IPTG诱导表达,并分析重组蛋白的表达形式。用Ni-NTA His柱对重组蛋白进行纯化。结果重组表达质粒pQE30-Hp1501a经双酶切鉴定构建正确,测序分析表明插入基因序列完全正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为37 000,表达量约占菌体总蛋白的21%,主要以包涵体形式存在,可与兔抗His单克隆抗体特异性结合;纯化的重组蛋白纯度达91%。结论成功原核表达并纯化了H.pylori NCTC11637株Hp1501蛋白,为H.pylori外膜蛋白的生物学功能和疫苗的研究奠定了基础。
【英文摘要】 Objective To express the Hp1501 protein of Helicobacter pylori NCTC11637 strain in prokaryotic cells and purify the expressed product.Methods The Hp1501a sequence in encoding region of Hp1501 gene of H.pylori NCTC11637 strain was amplified by PCR and cloned into vector pQE30.The constructed recombinant plasmid pQE30-Hp1501a was transformed to E.coli XL1-blue and induced with IPTG,and the expressed recombinant protein was analyzed for form then purified by Ni-NTAHis column chromatography.Results Restriction ...
【更新日期】 2011-12-27
【分类号】 R378
【正文快照】 研究表明,幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染是慢性胃炎、消化性溃疡发生的主要病因,并与胃癌的发生密切相关,世界卫生组织已将其列为Ⅰ类致癌因子。流行病学调查发现,H.py-lori感染还与冠心病、动脉硬化、血小板减少性紫癜、糖尿病及支气管炎等密切相关[1]。近年?

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