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NDM-1基因PCR检测技术的研究

The study of detection and identification of NDM-1 by PCR

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【作者】 吴兴海张云霞封立平邓明俊张治宇祝素贞曹际娟

【Author】 Wu Xinghai1, Zhang Yunxia1, Feng Liping 1, Deng Mingjun1, Zhang Zhiyu1, Zhu Suzhen1, Cao Jijuan2(1 Shandong Exit-Entry Inspection and Quarantine Bureau,Qingdao 266002,China;2 Liaoning Exit-Entry Inspection and Quarantine Bureau,Dalian 116000,China )

【机构】 山东出入境检验检疫局辽宁出入境检验检疫局技术中心

【摘要】 NDM-1基因是一种"超级细菌"特有的耐药基因,对于菌体的广谱抗药性起着决定性的作用。本研究以实现该基因的快速检测为目的,初步建立了NDM-1基因的PCR快速检测鉴定法。选取肺炎克雷伯氏菌ADB65的NDM-1基因为目的基因,设计并合成了PCR检测引物(ND-319-F和ND-319-R),并以另外11种标准菌株为对照,分别进行了PCR检测。结果表明,携有NDM-1基因的质粒DNA经过PCR反应都扩增出长为319bp的特异性片段,而其他对照病菌均未出现相应片段,证明这对引物具有NDM-1基因检测的特异性。灵敏度测定结果,此体系可检出100fg/μL质粒DNA模板。研究表明,PCR方法是一种特异、灵敏、快速的NDM-1基因检测方法。

【Abstract】 NDM-1 was an important gene of superbacteria with broad-spectrum resistance to antibiotic.A PCR method was developed to detect NDM-1gene.Specific primers were designed based on the gene sequence in GeneBank.The primers used in this assay were shown to be specific for plasmid with NDM-1 and did not react with other 11 standard bacteria strains. This technique was sensitive with the detection limit of 100 fg/μL DNA.PCR is a specific,sensitive,rapid and highly effective method for the detection and identification of NDM-1.

【关键词】 NDM-1PCR检测
【Key words】 NDM-1PCRdetection
【基金】 山东检验检疫局科技专项:食品中超级细菌耐药基因NDM-1基因多重复合痕量检测体系的建立(SK2008-19)
  • 【文献出处】 食品安全质量检测学报 ,Journal of Food Safety & Quality , 编辑部邮箱 ,2011年03期
  • 【分类号】Q503
  • 【被引频次】2
  • 【下载频次】155
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