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重组酵母Saccharomyces cerevisiae蛋白激酶Sch9的分泌表达与活性鉴定

Secretory expression and characterization of recombinant Saccharomyces cerevisiae protein kinase Sch9

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【作者】 刘昕吕逢春杜林方段伟刘科

【Author】 LIU Xin~1,LU Feng-Chun~1,DU Lin-Fang~1,DUAN Wei~2,LIU Ke~1 (1.College of Life Sciences,Sichuan University,Chengdu 610065,China; 2.School of Medicine,Deakin University,Waurn Ponds,Vic.3217,Australia)

【机构】 四川大学生命科学学院澳大利亚维多利亚州迪肯大学医学院

【摘要】 为了深入研究蛋白激酶Sch9的生物化学特性,在Pichia pastoris酵母KM71H菌种中分泌表达并纯化了重组Sch9蛋白.进一步通过体外磷酸化实验分析了重组Sch9蛋白的蛋白激酶活性.通过重组蛋白质工程的手段初步研究了Sch9蛋白的生物化学和酶学特性.

【Abstract】 To facilitate the biochemical characterization of Sch9,the recombinant Sch9 protein was prepared in Pichia pastoris strain KM71H.An N-terminally polyhistidine tagged protein kinase Sch9 was produced and purified via affinity chromatography.After confirming the identity of the recombinant Sch9 protein,was its enzymatic activity further analyzed by an in vitro kinase assay.Our study provides the first insight into the biochemical properties and enzymatic activity of Sch9 via a recombinant protein engineering approach.

【关键词】 酵母蛋白激酶表达
【Key words】 Saccharomyces cerevisiaeprotein kinaseexpression
【基金】 中国国家自然科学基金(30671181);中国国家重点技术研发项目(2006BAF07B01)
  • 【文献出处】 四川大学学报(自然科学版) ,Journal of Sichuan University(Natural Science Edition) , 编辑部邮箱 ,2011年05期
  • 【分类号】Q55
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