尾加压素Ⅱ刺激大鼠血管外膜成纤维细胞表达白细胞介素-6的作用及机制研究

【摘要】 目的白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）在心血管炎症反应和动脉粥样硬化过程中发挥着重要作用。该研究旨在阐明尾加压素Ⅱ（UrotensinⅡ,UII）刺激大鼠血管外膜成纤维细胞表达白细胞介素-6的作用及其细胞内信号转导机制。方法取雄性SD大鼠,采用组织贴块法培养主动脉血管外膜成纤维细胞,实验采用第3-5代细胞。实验分组:（1）对照组;（2）UII刺激组,包括不同浓度UII刺激组(10^-1、10^-9、10^-8、10^-7mol/L)和不同时间刺激组（1 h,3 h,6 h,12 h,24 h）;（3）UII(10^-8 mol/L)+细胞内不同信号通路抑制剂组,抑制剂在UII(10^-8 mol/L)刺激之前30分钟加入,孵育3 h或12 h（分别检测IL-6 mRNA表达和分泌量）,余操作同上。实验结束时,收集细胞采用RT-PCR检测细胞IL-6 mRNA表达量;收集培养液,采用ELISA方法检测IL-6蛋白分泌量。结果 UII以浓度和时间依赖性方式刺激细胞IL-6基因和蛋白分泌,至10^-8mol/L UII达高峰（P<0.01）。UII(10^-8 mol/L)刺激细胞后,IL-6 mRNA表达3 h达高峰,蛋白分泌24小时达高峰。UII刺激IL-6表达的作用能被UII受体阻断剂SB710411、钙通道阻断剂nicardipine、钙调神经磷酸酶抑制剂环孢素A、促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）抑制剂PD98059、蛋白激酶C（protien kinase,PKC）抑制剂H7和Rho激酶抑制剂Y-27632所抑制。结论 UII能够以浓度和时间依赖方式促进大鼠主动脉血管外膜成纤维细胞IL-6的表达,该效应可通过UII受体、钙离子通道、钙调神经磷酸酶、MAPK、PKC和Rho激酶信号途径来实现。并提示IL-6可能介导了UII参与血管炎症和动脉粥样硬化的发生和发展。更多还原